发酵豆粕检测项目及方法

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1、发酵豆粕各项指标检测方法与标准1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。4、可溶蛋白的测定方法5、小肽含量的测定　　　　　　　　　　　水份的测定水份测定直接参见国标测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。　　　　　　　　　　　总有机酸检测试剂：NaOH标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞

2、指示剂仪器:磁力搅拌器离心机方法：（1）取发酵后鲜样品15g置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。（2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。（3）取上清液15ml,加30ml去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。（终点到溶液呈现粉红）计算乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH)×0.09008/15×115/15gN(NaOH):NaOH标准溶液的浓度；V(NaOH)：消耗NaOH标准溶液体积；0.090

3、08：乳酸的毫克当量。0.1mol氢氧化钠的配制与标定1、配制：称取9.6g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却)，摇匀。2、标定称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml的无二氧化碳水中，加4滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。3、计算氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042

4、式中      c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l；            V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml；            V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml；            m——邻苯二甲氢钾之质量，g；    0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。　　　　　　　　　　　乳酸测定称取样品10g与50ml的

5、烧杯中，移取30ml去离子水，在磁力搅拌器上搅拌30min，在3000r/min离心10min，取上清液利用气相色谱或液相色谱测定乳酸含量。　　　　　　　　　　　pH的测定称取样品10g与50ml的烧杯中，移取15ml去离子水，搅拌30min，用pHS-3C型pH计测定溶液的pH值。或者用精密pH试纸测试。　　　　　　　　　　可溶性蛋白的测定根据AOCSBa11-65测定蛋白质溶解指数的方法称取20g样品于300ml的匀浆杯中、量取50ml37＋1℃的去离子水于匀浆杯中，将匀浆杯放在37℃的水浴中，浸泡搅拌5min，在内切式组织匀浆机上匀

6、浆10min，从匀浆杯中取出浆液移入600ml烧杯中，待浆液分层后，移出40ml上清液注入50ml离心管中，并在2700r/min的转速下离心10min，移取15ml上清液于凯氏烧瓶中，测定上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量，计算溶解可溶性蛋白质的数量。　　　　　　　　　　小肽含量测定方法三氯乙酸（TCA）法三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白质在TCA溶液中沉淀，除去酸不溶蛋白质，然后测定酸溶蛋白含量。国外大量资料表明在蛋白质酶水解的研究中测定水解度，通常在酶解液中加入TCA溶液，是为水解的大分子蛋白质沉淀，而与小分子的酸溶蛋白成分，即肽

7、类和FAA离开，测定酸溶蛋白占总蛋白的含量，求得水解度，即酸溶蛋白占总蛋白的百分比。粗蛋白≥50％    小肽（1000d以下）≥10％乳酸≥3.5％    水分≤10％钙0.5－0.54％  总磷≥0.74％/gm益生菌≥20亿/克  蛋白酶≥150粗脂肪≤5.0％    粗纤维≤3.0％无氮浸出物≤28％  粗灰分≤6.0％猪消化能（kcal/kg）3980猪代谢能（kcal/kg）3600猪净能（kcal/kg）2320禽代谢能（kcal/kg）2570鱼消化能（kcal/kg）3200奶牛净能（kcal/kg）1090项目    

8、  含量天门冬氨酸Asp  5.42%赖氨酸Lys      3.03%蛋氨酸Met      0.65%苏氨酸Thr      2.05%精氨酸Arg      3.50%甘氨酸Gly