2011分子生物学考试题(常部分)

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1、2011年分子生物学（常部分）复习题:1简单解释以下概念启动子、假基因、单核苷酸多态性（SNP）、原位杂交、westernblot免疫印迹法是SDS-PAGE电泳的高分辨率与免疫反应的高度特异性相结合。待测样品经SDS-PAGE电泳分离后，转移到固相介质如醋酸纤维膜上，然后用标记抗体揭示特异抗原的存在。此法广泛用于蛋白质样品分析研究。基因knockout鼠、基因组、转基因小鼠将特定的目的基因从某一动物体分离出来，进行扩增和加工，再导入另一动物的早期胚胎细胞中，使其整合到宿主动物的染色体上，在动物的发育过程中表达，并通过生殖细胞传给后代。这种在基因组中稳定地整合

2、外源基因的动物称转基因动物（transgenicanimal）。实时定量PCR所谓的实时荧光定量PCR就是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。限制性内切酶、质粒DNA、免疫组织化学免疫组织化学（Immunohistochemistry）是利用特异性抗原抗体反应，观察和研究组

3、织细胞特定抗原（或抗体）的定位和定量的技术。为了显示组织和细胞内抗原抗体反应，需要预先将某种标记物结合到抗体上，借标记物的荧光或酶的有色反应，在显微镜下进行定性、定位或定量观察。免疫组化染色法分为①免疫荧光法和②免疫酶法1、酶免疫组化技术原理：利用抗原和抗体反应后，加入酶的相应底物，在酶的催化作用下，发生水解氧化，生成有色产物的显色反应，以揭示组织切片上存在的微量抗原2、免疫荧光染色法原理：根据抗原抗体反应的原理，利用在紫外线照射下能激发产生荧光的荧光素，使之与抗体分子以共价键形式牢固结合，而不损害抗体的免疫活性，这种结合物称为荧光抗体。DNA芯片、蛋白质芯片

4、原理：RNA经过变性琼脂糖凝胶电泳分离后，转移到硝酸纤维膜或尼龙膜上，经过杂交，分析mRNA的大小及含量。应用：半定量分析mRNA的含量；确定mRNA分子的大小。方法：提取组织细胞总RNA→RNA定量→变性胶电泳→转膜→干膜→预杂交→杂交→洗膜→压片→洗片→图像分析HRM原理：将PCR扩增产物进行变性，期间实时检测体系内荧光信号。荧光值随着温度升高而降低，可绘制基于温度和荧光值函数的融解曲线。根据曲线区分野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子。Northernhybridization原理：RNA经过变性琼脂糖凝胶电泳分离后，转移到硝酸纤维膜或尼龙膜上，经过杂交，

5、分析mRNA的大小及含量。应用：半定量分析mRNA的含量；确定mRNA分子的大小。方法：提取组织细胞总RNA→RNA定量→变性胶电泳→转膜→干膜→预杂交→杂交→洗膜→压片→洗片→图像分析realtimePCR、1ststrandcDNA、通用转录因子将RNA聚合酶与启动子结合到一起，形成转录复合物的因子。顺式作用元件是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子

6、。功能基因组学、HGP、GWAS、tagSNP、haplotpe、HapMap：人类基因组单体型图计划，这项计划旨在分析人类不同群体的差异，并在此基础上进一步分析所有与疾病相关的基因序列差异，为21世纪的“个人医学”奠定基础。单体型图是人类基因组的遗传整合图，将使人类对基因组的研究更为全面、有效、准确、经济。CNV、DNA重复序列、系统生物学、转录组学、表达芯片、miRNA是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA。已经被鉴定的miRNAs据推测大都是由具有约70个碱基大小形成发夹结构的单链RNA前体经Dicer酶加工后生成的.miRNAs有5’端磷酸基和

7、3’羟基。miRNAs被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3’非编码区端，阻断mRNA的翻译。在线虫、果蝇、小鼠和人等物种中已经发现的数百个miRNAs。这些miRNA在不同组织、不同发育阶段中有显著的表达差异。对一部分miRNAs的研究分析表明：miRNAs参与生命过程中一系列的重要进程，包括早期发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞死亡、脂肪代谢和细胞分化。lincRNA长链非编码RNA（largeintergenicnon-codingRNA，lincRNA）虽然与蛋白质合成无关，但能形成一定的二级结构，被认为能与蛋白质形成复合体，调节蛋白的功能。、siR

8、NA2简单回答以下问题(1)简述人类基