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时间:2018-07-25
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1、肌红蛋白测试标准操作流程一实验组成1实验仪器及器具:MiniVIDAS全自动分析仪一台、洁净工作台、低速离心机、20~200µl加样器2试剂盒组成:MYO试剂条说明:试剂条上有10个孔,用贴有标签的铝箔密封二实验原理一步免疫分析夹心方法(sandwich)和最后荧光检测(ELFA)样品被吸取到含有用碱性磷酸酶(共扼物)标记的抗肌红蛋白抗体的孔中。样品/共扼物混合物在运行中进出固相包被针SPR数次。该操作使抗原结合到固定在固相包被针SPR内壁的免疫球蛋白上,并结合到共扼物上,以形成“夹心”。没有结合的组分在冲洗步骤中清除。在最后检测步骤中,将底物(磷酸4甲基-伞形
2、烷)循环进出固相包被针SPR。共扼物酶催化本底物水解成荧光产物(4-甲基伞形酮)。该产物的荧光在450nm下测量。荧光强度与样品中出现的抗原的浓度成正比。分析结束的时候,由VIDAS根据储存在存储器中的校正曲线,自动计算结果,然后打印输出三标本1检测样本:150µl血清或血浆(肝素锂)由于EDTA或柠檬酸钠引起所测量的数值的下降,所以不可使用在EDTA或柠檬酸钠上采集的血浆2影响因素没有发现下列因素对分析有显著影响:(1)溶血(用血红蛋白形成尖峰样品(spiking)之后:0到292µmol/l或0到470mg/dl)(2)脂血症(在用脂质形成尖峰样品(spik
3、ing)之后:0到30g/ml,等价于在三酸甘油酯中)(3)胆血症(在用胆红素形成尖峰样品(spiking)之后:0到540µmol/l)(4)肝素(最高达50IU/ml)但无论如何,建议不要使用明显溶血、脂血症、胆血症的样本,如可能的话,重新收集样本。四操作程序1标准曲线条码(MLE)输入在每使用新一批试剂前,必须用每一试剂盒中都有的MLE卡(规格单)将规格(或工厂主校正曲线数据)输入仪器。步骤如下:(1)按MasterLotMenu(2)放入MLE卡片(3)按ReadMasterLot(4)按A或B读取完成后,仪器会自动打印相应信息2校准曲线当新一批试剂开启
4、时,在主批次数据(MLE卡片)输入后,应用试剂盒中的两种校准液执行校准,然后每14天应重新校正一次。(1)按说明书溶解标准品S1和质控品C1(2)按StatusScreen,选择A或B(3)键盘输入位置1,按S,再键入1,回车(自动跳到下一位置)(4)按s,键入1,回车(5)重复以上步骤输入C1后,回车(6)屏幕显示S1,S1,C1(7)在机器中放入相应试剂条和SPR,并且加入上述校准品(8)开始测试测试大约需要20min,结束后机器将自动计算结果并打印3标本测试(1)按StatusScreen,选择A或B(2)键盘输入位置1,按sampleid,再键入标本编号
5、,回车(自动跳到下一位置)(3)重复以上步骤(4)输入完成后,按返回键(5)屏幕显示已输入的标号(6)在机器中放入相应试剂条和SPR,并且加入对于待测标本(7)开始测试测试大约需要20min,结束后机器将自动计算结果并打印五结果判读1性能检测范围5-1000mg/l检测下限<5mg/l日内重复性在183mg/l,CV1.6%,在346ug/l,CV3.2%,在728mg/l,CV3.0%日间重复性在183mg/l,CV3.3%在346ug/l,CV3.8%,在728mg/l,CV4.4%2结果解释期望值:10-46.0mg/l根据对197个无心脏病历史的病人进行
6、的评估,95%在10-46.0mg/l。
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