一个棉花myb转录因子的克隆与载体构建毕业论文

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1、一个棉花MYB转录因子的克隆与载体构建毕业论文目录中文摘要、关键词Ⅰ英文摘要、关键词III引言1第1章MYB类转录因子简介31.1MYB类转录因子介绍31.2MYB类转录因子的结构特点及分类31.3MYB类转录因子在拟南芥中的作用31.4MYB类转录因子在棉花中的作用4第2章目的基因的获得72.1材料与方法72.2试验方法72.2.1目的基因的获得72.2.2克隆载体构建82.3结论与分析9第3章质粒载体的获得113.1获取质粒载体113.1.1质粒的提取113.1.2大肠杆菌的制备123.1.3获得澄清的裂解液133.1.4质粒DNA的分离及纯化操作方法133.2

2、pBI121的双酶切及酶切产物胶回收143.3结果与分析1523.3.1pBI121质粒提取结果153.3.2双酶切图谱15第4章CPC5基因表达载体的构建174.1In-fusion酶技术连接的原理174.2In-fusion酶技术连接的具体操作174.3质粒载体转化农杆菌18第5章表达载体的PCR菌落鉴定195.1PCR菌落鉴定的原理195.2感受态细胞的制定195.3将基因片段转入到感受态细胞中195.4菌落PCR并电泳检测205.5结论与分析20结论23参考文献25致谢272一个棉花MYB转录因子的克隆与载体构建摘要：棉纤维与拟南芥表皮细胞都是单细胞，均源于

3、表皮细胞。许多研究证明棉纤维的起始很可能与拟南芥表皮毛，根毛发育共享一套相似的机制。植物中最大的转录因子家族是MYB类转录因子，其中在拟南芥中已发现超过198个MYB家族基因。Martin等认为，在植物体中，MYB相关转录因子所进行的转录调控发挥了十分重要的作用。在植物进化过程中，MYB蛋白在植物代谢和发育的各个方面起着重要的调控作用，其主要功能是调节次生代谢、控制细胞形态发生以及调控分生组织形成和细胞周期等。Lee和Schiefelbein综合根毛突变体的研究结果，提出了一个调节根表皮细胞发育的分子模型，认为CPC这个MYB转录因子是决定根表皮细胞命运的关键因素之

4、一。本研究的目的基因为棉花徐州-142中一个MYB基因片段GhCPC5，载体为pBI-121质粒载体。主要利用In-fusion酶连接技术将上述两个目的基因分别连接到质粒载体上。然后通过PCR菌落鉴定法鉴定连接的质粒载体是否符合要求。关键词：棉花MYB基因GhCPC5质粒载体IIIIStudyonCloningandVectorConstructionofaMYBTranscriptionFactorinCottonAbstract：CottonfiberandArabidopsistrichomewhichderivedfromepidermisaresingle

5、cells.ManystudiessaidthatcottonfiberwaslikelytoshareasimilardevelopmentmechanismwithArabidopsistrichom.ThelargestfamilyoftranscriptionfactorsintheplantMYBtranscriptionfactor,whichhasbeenfoundmorethan198MYBfamilygenesinArabidopsis.Martinreportedthat,thetranscriptionalregulationofMYBtran

6、scriptionfactorplaysaveryimportantroleintheplant.MYBproteinplaysanimportantroleinregulatingvariousaspectsofplantmetabolismanddevelopment,itsmainfunctionistoregulatesecondarymetabolism,controlofcellmorphogenesisandregulationofmeristemformationandcellcycle.TheresultsofLeeandSchiefelbeinr

7、oothairmutants,proposeamolecularregulationofrootepidermalcelldevelopmentmodel,thattheCPCMYBtranscriptionfactorisoneofthekeyfactorstodeterminetherootepidermalcellfate.ThepurposeofthepresentstudygenecottoninXuzhou-142,atheMYBgenefragmentGhCPC5vectorpBI-121plasmidvector.ThemainuseoftheI