核糖体印记技术[2篇]

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2、->polypeptide->proteinProteinlevels26areafunctionof:•RNAstability•Proteinstability•RegulationoftranslationTranslation?simplerulesaboutthenatureoftranslation•Ribosomecombinewith5’cap•ORFshaveaminimumlength•StartatthefirstAUG•BiasedcodonusageExceptions•IRES;

3、TEE•initiationatnon-AUGcodons•leakyscanning•translationalreinitiation•translationalframeshiftsWhatisRibosomeprofiling?ProteinsynthesisRibosometranslatingmRNAmRNARibosomeprofiling:isolateandsequenceonlythemRNAprotected/activelytranslatedbytheribosomeWhyisRi

4、bosomeProfilingImportant?Howcanyoutellhowmany26flowerswouldbethereviathenumberofbuds?No,youcannot.WhyisRibosomeProfilingImportant?HightranslationPoortranslationRibosomeProfilingvs.RNA-seqWorkflowdifferencesARTseq™RibosomeProfilingKitsLibraryPrepRNA-seqgive

5、sinformationONLYaboutmRNAabundanceRibosomeprofilingcanbeusedasaproxyforproteinexpression•DNAtoRNAtoProteinScriptSeq™Complete,TotalScript™RibosomeProfilingApplication►►►GenomewideinvestigationoftranslationinyeastDefinedactualproteinsequencesbeingtranslatedA

6、bsoluteproteinabundanceandresponsetoenvironmentalstressRibosomeProfilingApplicationRibosomeProfiling26Application►►►►DeterminingratesoftranslationelongationStrongpausesitesandunannotatedtranslationproductsuAUGandnon-AUGcodonsDefineaclassofshort,polycistron

7、icribosome-associatedcodingRNAs(sprcRNAs)thatencodesmallproteinsHarringtonine:三尖杉酯碱Cycloheximide:放线菌酮RibosomeProfilingApplicationsprcRNAs:short,polycistronicribosome-associatedcodingRNAsRibosomeProfilingApplication►MicroRNAsregulategeneexpression►Ribosomep

8、rofilingshowedthatmiR-430regulatestranslationinitiationbeforeinducingmRNAdecayduringzebrafishdevelopment.RibosomeProfilingApplication►MicroRNAsregulategeneexpression►RibosomeprofilingshowedthatmiR-430regulate

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