atp生物荧光肿瘤体外药敏检测技术的建立及其(已处理)

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1、ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术ATP-TCA的建立及其临床应用研究答辩提纲第一部分ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术概述第二部分ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术及质量标准的建立第三部分ATP-TCA技术的临床应用研究第一部分研究背景化学治疗是肿瘤的三大治疗手段之一近30年来虽然某些恶性肿瘤的化学治疗有明显改善但多数肿瘤特别是实体瘤疗效仍不理想这与肿瘤存在个体差异性以及多重耐药性等因素有关因此如何选择有效药物进行有的放矢的治疗早已成为化疗界所关注的问题2ATP生物荧光药敏检测技术的优点3ATP-TCA技术原理第二部分ATP-TCA药敏检测技术及质量标准的

2、建立ATP-TCA技术的核心试剂1荧光酶试剂热稳定性和发光效率均好的重组酶试剂保证检测的敏感性和可靠性满足临床实际工作的需要2培养基肿瘤细胞选择性培养基支持肿瘤细胞生长增殖促进正常细胞死亡从而保证药敏检测的肿瘤细胞特异性重组荧光酶制剂稳定性研究质量标准ATP-TCA药敏检测的临床应用一例经多重化疗复发的睾丸癌病人药敏检测结果治疗效果2健择与表阿霉素的联合方案3化疗药物新适应症研究讨论研究总结发表论文致谢正常卵巢上皮细胞及成纤维细胞培养结果正常上皮细胞培养抑制效果图成纤维细胞培养抑制效果图培养前后细胞组成变化培养前细胞组成6天培养后细胞组成淋巴上皮成纤维肿瘤淋

3、巴上皮成纤维肿瘤细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞40-5010-255-1010-201101075选择性培养基的研究结果表明该培养基具有良好的选择性适合肿瘤体外药敏检测的需要1培养基对肿瘤细胞生长支持程度以MCF-7细胞系作为标准细胞系按2000个细胞孔接种浓度接种至96孔培养板中培养七天后要求测定的RLU值4000002ATP标准曲线将ATP标准品配成250ngml倍比3×稀释7次做出ATP浓度与RLU扣除本底吸收值的标准曲线要求r0995最小ATP浓度011ngml的RLU4003精密度选MCF-7细胞系低中高5001000040000个数目的细胞分别

4、测定十组RLU值要求CV104敏感度50个MCF-7细胞440RLU同时本底值200RLU第三部分ATP-TCA体外药敏检测技术的临床应用研究ATP-TCA药物测试方式评价标准强敏感SSIC5025及IC90100PPC中度敏感ISIC5025及IC90100PPC轻度敏感MSIC5025及IC90100PPC耐药RIC5025及IC90100PPCIC90抑制90肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比IC50抑制半数肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比PPC一定临床用药剂量对应的血浆峰值浓度临床相关性研究病人资料表1卵巢癌体外药敏检测与临床疗效的比较临床相关性研究初

5、步结果例数体外检测体外检测敏感SSIS耐药WSR共计体内敏感CRPR体内耐药SDPD1822011112共计19133234例卵巢癌中可评价标本为32例标本可评价率为941表2卵巢癌体外药敏检测真实性评价阳性预测值阴性预测值灵敏度特异性90694784690917整体预测值1设计个体化治疗方案2研究新的联合化疗方案3化疗药物新适应症研究1设计个体化治疗方案检测结果分析药物名称IC50PPC杀伤作用评估BLMDDPVCR1269部分敏感药物BLMDDP5-FU1859轻度敏感药物BLMCBPVP161479部分敏感药物VP16CBP2816轻度敏感药物THPD

6、DP5-FU1479部分敏感药物VP16DDPVCR632较敏感药物IFOVP16ADM255轻度敏感药物CTXADMCBP324耐药药物NVBEPI076强敏感药物治疗前该患者经多重化疗方案复发颈侧右锁骨下胸壁纵隔淋巴结广泛转移气管食管压迫移位并伴有吞咽困难胸水活检发现癌细胞淋巴结病理活检证实为绒毛膜上皮癌HCG激素水平为600uml治疗后NVBEPI方案一个半周期以后胸水消失颈侧右锁骨下胸壁纵隔淋巴结病灶缓解或消失可以进食HCG激素水平降至60uml因此ATP-TCA技术对于开展肿瘤患者的个体化治疗极具指导意义2卵巢癌新的联合用药方案研究肿瘤细胞对化疗药

7、物的反应强敏感SS中度敏感MS轻度敏感LS耐药R例数3261484体外有效率=SSMSn614326251健择与顺铂的联合方案肿瘤细胞对化疗药物的反应强敏感SS中度敏感MS轻度敏感LS耐药R例数102332体外有效率=SSMSn231050羟基喜树碱Hydrocamptocin原用途消化道和泌尿系肿瘤例数强敏感SS中度敏感MS轻度敏感LS耐药R32451310有效率=SSMSn4532281肿瘤细胞对化疗药物的反应卵巢癌原代培养药敏测试结果长春瑞宾VinorelbineNavelbine原用途非小细胞肺癌转移性乳腺癌例数强敏感SS中度敏感MS轻度敏感LS耐药

8、R肿瘤细胞对化疗药物的反应体外有效率=SSMSn25

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