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1、黄芩含量测定方法(黄芩苷)黄芩为唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其黄芩苷的含量,文献报道的含量测定方法较多,主要有高效液相色谱法、薄层扫描法和紫外分光光度法等。2d,?8V2c0p/~0w-_7Gwww.plantextra.com 一、高效液相色谱法/j4{2X(`,L3}+b"_3v 2005版《中国药典》黄芩含量测定项下:6@3
2、3Q4J,E'x5y$R!]中国植物提取物论坛 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波
3、长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2500。1Wt7n,M#p4m8`(Y${ 供试品溶液的制备:取本品中粉约0.3g,精密称定,加70%乙醇40ml,加热回流3小时,放冷,滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀。精密量取1ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。*m0X;b9u:c植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网 文献报道的采用HPLC法测定黄芩苷的含量,所用的色谱条件较多,按照常用的流动相系统介绍。中国植提论坛
4、植提网%I-H2R7u!}1K#o A:甲醇-水-磷酸系统:
5、+t"f2r'R'F" ①Waters600高效液相色谱仪;Shim-packODSC18柱(150mm×6.0mm);流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(45:55);流速1.0ml/min;检测波长280nm。5LR.V8F)f ②日本岛津LC-4A高效液相色谱仪;色谱柱:ZORBAXsb-C18(4.6mm×25cm);流动相:甲醇-0.4%磷酸(1∶1);流速1.0mL/min;室温25℃±2℃;检测波长280nm。:w$R1Y*S8g:R中国植提论坛
6、植提网 ③waters-600高效液相色谱仪;色谱柱:ODSC18柱(610nm×150nm);流动相:磷酸(1→146)-乙腈
7、(18:7);流速1ml/min;检测波长277nm;柱温:25℃。/e!m0K+k2E4n4f:]+]植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网 ④Waters515高效液相色谱仪;色谱柱:HangBangC18(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);检测波长280nm;流速为1.0mL/min。中国植提论坛
8、植提网&e)J7w!k5P,sN.P ⑤岛津LC-2010高效液相色谱仪;色谱柱C18反相柱(150mm×4.6mm);柱温40℃;流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速1.0ml/min;检测波长280nm。'C+e)
9、V2Y6S0H1~中国植物提取物论坛 样品一般用甲醇、流动相、70%乙醇超声或回流提取,也有蒸馏水为提取溶剂的。中国植提论坛
10、植提网5X6N#p8d-s)Z2H8?9V9t植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网6Q*S+X;i)f4t&a%m,
11、%e"M B:甲醇-水-冰醋酸系统:&u5L$]2l-O+d&V ①液相色谱仪(美国光谱物理公司);色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18反相柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈-水-冰醋酸(25:22:75:1);柱温室温;流速1.0ml/min;检测波长为277nm。供试品溶液的制备:咳喘静糖浆用正丁醇5
12、分3次萃取(以PbAC试液检查母液中黄芩苷为负反应),取上层液合并,80℃水浴蒸干。残渣加4ml甲醇溶解后通过柱层析(中性氧化铝,100~200目,1cm),用15mL甲醇洗脱,收集全部滤液,蒸干,残渣用5mL甲醇溶解后,用甲醇定容至25mL。精密量取上述溶液3mL,用流动相稀释定容至10mL,作为供试品溶液。(金 虹,“高效液相色谱法测定咳喘静糖浆中黄芩苷含量的研究”,西南科技大学学报,2005,20(3))-HC.y7vd/y7z0Z5?a/g%e中国植物提取物论坛 ②HP-1100高效液相色谱仪(美国惠普公司);色谱柱:ODSC18柱(Zobax),粒径5μm,柱径4.5mm,柱长25
13、0mm;)流动相:甲醇-水-醋酸=45∶55∶1;流速2.0ml/min;柱温40℃;检测波长:274nm。中国植提论坛
14、植提网!b*P&M*o#^3u%X7^ ③大连依利特P200Ⅱ液相色谱仪;色谱柱:十二烷基硅烷健合硅胶柱(25mm×4.6mm);流动相:乙腈-0.3%磷酸水溶液(100:400);检测波长203nm;流速1.0ml/min;柱温室温。7T$k2_*w&}!Y.D*d7c+J