生物分析检测技术

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1、一、高速离心机原理：离心机就是利用离心力使得需要分离的不同物料得到加速分离的机器。其主要分为过滤式离心机和沉降式离心机两大类。过滤式离心机的主要原理是通过高速运转的离心转鼓产生的离心力（配合适当的滤材），将固液混合液中的液相加速甩出转鼓，而将固相留在转鼓内，达到分离固体和液体的效果，或者俗称脱水的效果。沉降式离心机的主要原理是通过转子高速旋转产生的强大的离心力，加快混合液中不同比重成分（固相或液相）的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。高速冷冻离心机一般最大转速为10000～30000rpm，最大相对离心力为90000×g左右，最大容量可达3升，

2、分离形式也是固液沉降分离，转头配有各种角式转头、荡平式转头、区带转头、垂直转头和大容量连续流动式转头、一般都有制冷系统，以消除高速旋转时转头与空气之间摩擦而产生的热量，离心室的温度可以调节和维持在0～40℃，转速、温度和时间都可以严格准确地控制，并有指针或数字显示使用方法：一、离心机的准备：在离心操作前必需首先准备好离心机。备机包括：1.机型的选择：即根据具体的实验要求选择水平式离心机或斜角式离心机。2.离心套筒的准备：检查离心套筒内是否有橡皮缓冲胶垫，胶垫上若附着碎玻璃等杂物应清除。3.离心机检查：检查离心机安放是否平稳，转轴是否牢固，润滑是否良好，离心腔内有无

3、异物，缸盖能否锁紧等。二、电源的准备电源应选择与离心机使用说明书相吻合的电源，电原插座必须有地线以保证离心安全。若实验室没有合适的电源，则应重新安装电源线，电源插座应靠近离心机以方便操作。三、平衡附件的准备平衡附件包括：1.天平：普通离心机用1／1000的台秤进行离心平衡，台平上固定两个等重的烧杯，以备平衡之用。2.离心管和配平管：离心管用于装离心液，配平管用于装配乎液(注意：配平管的长度一般不宜超过离心管的长度，以避免水平离心时被转轴打碎)。3.烧杯与皮头吸管：烧瓶用来盛配平液，皮头吸管用来吸配平液进行配平。四、离心液的准备  离心液应根据具体的实验要求进行准备

4、。五、试机在以上准备完成以后，应先让离心机进行空载运转，密切观察空载运转情况是否正常，在无异常时方可进行离心。二、实验操作：1．取离心管装上离心液放于一对重量相近的离心套筒的橡胶孔中，离心液面距离心管口至少应留2cm的距离，以免离心时离心液溅出。2．调平称量天平，将置于离心机对称位置上的离心套筒、离心管及内盛物配平，相差不超过0.05克，将平衡好的离心套筒放于离心机支架对称位置的吊环中，上离心机缸盖，锁牢。。3．检查离心机是否安放平稳，电源开关及调速杆。4．设置离心机的操作参数（速度、时间、温度）。5．插上电源插头，打开电门开关。6．按Start键，离心机运行。离

5、心完毕，将调速杆缓慢退回到‘零位”，关掉电门，拔下电源插头，任离心机自停（切记：不能用手助停，以免沉淀物泛起、损坏离心转轴、碰伤人的肢体）。7．待离心机完全停止转动后，打开缸盖取出离心套筒及离心管。8．清洁离心套筒、离心管及离心腔。9.纪录离心机的使用情况。注意事项：1.离心前必需将放置于对称位置上的离心套筒、离心管及离心液进行精确平衡，重量差不超过0.05克。对于高速和超速离心机，不仅要求重量平衡，而且要求配平液的密度与离心液的密度相等，以达到力矩平衡。2.离心机安放要求水平、稳固，转轴上的支架要牢固，转轴润滑良好，吊栏应活动自如，保证离心机的正常运转。3.离心

6、管盛液不宜过满，避免腐蚀性液体溅出腐蚀离心机，同时造成离心不平衡。4.离心开始前应检查转头是否拧紧。放入离心套筒后应紧盖、锁牢，防止意外事故的发生。离心完毕应关电门、拔掉电源插头任机自停，严禁用手助停，以免伤人损机，使沉淀泛起。5.注意离心机的保养和“四防”。离心机使用完毕，要及时清除离心机内水滴、污物及碎玻璃渣，擦净离心腔、转轴、吊环、套筒及机座。经常做好离心机的防潮、防过冷、防过热、防腐蚀药品污染，延长使用寿命。6.离心过程若发现异常情况应立即按Stop键，然后，再进行检查。如听到碎玻璃渣声响，可能是试管被打碎，应重新更换试管。若整个离心机座转动起来，则是严重

7、不平衡所至。若离心机不转动，则可能是保险丝烧断，应重新更换保险丝。若发生机械或电机故障，应报告指导教师请专门维修人员检修。生物学应用:通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等的分离与纯化工作，但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如核蛋白体)或单个分子。二、流式细胞仪原理：参数测量原理流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。

8、散射光的强