吗啡、芬太尼、曲马多对jurkat细胞核因子(b和il-2的影响

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1、麻醉学基础研究2005年麻醉年会征文吗啡、芬太尼、曲马多对Jurkat细胞核因子kB和IL-2的影响深圳市第二人民医院麻醉科518035刘志恒华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科430030高峰田玉科课题项目：本课题受教育部回国人员启动基金资助（教外司留[2002]247）摘要前言：吗啡、芬太尼和曲马多是三种常用的麻醉性镇痛药，体外实验已表明吗啡具有免疫抑制作用，而对另两种药物的免疫调控作用研究较少。核因子kB(NF-kB)是一种重要的转录因子，能够调控多种免疫相关基因的表达，被称为“免疫反映的核心调节物”。本实验以人

2、淋巴瘤细胞系Jurkat细胞为研究对象，探讨三种药物对NF-kB的活性及IL-2合成的影响。方法：细胞培养采用RPMI1640完全培养基，在37℃含3%CO2条件下体外传代。实验前一日将细胞稀释到3-5×105/ml，置于5只60mm无菌培养皿，并编为①-⑤号。实验当日先分别在③④⑤号中加入吗啡（38μg/ml）、芬太尼（20ng/ml）和曲马多（7.5μg/ml），即为各自10倍有效血药浓度，孵育1h后将0.25μg/mlPMA加入②-⑤号，再孵育1h，随后将细胞转入离心管，1500rpm离心5min，所获上清液用于检测

3、IL-2活性（采用ELISA法），沉淀的细胞用于提取细胞内总蛋白，后者所用方法为本实验室常规的TOTEX法。采用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测细胞蛋白中NF-kB活性，每张EMSA光片经透射扫描处理后分析积分灰度值（灰度´面积），用以判定NF-kB的相对含量。以上实验由不同操作者重复5次，计量资料以SPSS10.0软件统计，组间比较采用单因素方差分析。结果：1.三种药物对NF-kB活性的影响（见附图）：阴性对照NF-kB积分灰度值638±97，阳性对照为8977±3麻醉学基础研究2005年麻醉年会征文862，二

4、者有极显著差异（p<0.01）；吗啡、芬太尼和曲马多组的NF-kB积分灰度值分别为1221±687，1095±732和6853±911，前二者与阳性对照有显著差异（p<0.05），而后者无显著差异（p>0.05）；2.三种药物对Jurkat细胞IL-2分泌的影响：阴性和阳性对照IL-2分别为10.0±2.4pg/ml和17.9±5.6pg/ml，二者有显著差异；吗啡、芬太尼组IL-2水平分别为12.6±3.8pg/ml和14.2±4.9pg/ml，均显著低于阳性对照（p<0.05），而曲马多组为28.6±5.6pg/ml，

5、显著高于阳性对照（p>0.05）。讨论：如果术后镇痛药物对免疫功能有损害，可能会加重术后病人的免疫抑制，促进并发症的发生。本实验结果提示吗啡使NF-kB和IL-2降低，这与文献报道吗啡的免疫抑制作用是一致的；据报道离体芬太尼对T细胞产生IL-4及NK细胞的活性有抑制作用，而这些免疫指标可受NF-kB的调控，本实验所显示的芬太尼使NF-kB活性降低的作用，可能是体外芬太尼免疫抑制作用机制之一；Sacerdote等发现曲马多可明显增强大鼠脾细胞的增殖、NK细胞的活性及IL-2的分泌，而本实验结果提示曲马多对NF-kB的活性无明

6、显影响，因此推测其免疫增强作用可能不是通过NF-kB介导的。3麻醉学基础研究2005年麻醉年会征文附图游离寡核苷酸NF-kB12345图1吗啡、芬太尼、曲马多对Jurkat细胞NF-kB活性的影响1：阴性对照；2：阳性对照（仅第2h加入PMA）；3：吗啡孵育1h后加入PMA再共同孵育1h;4：芬太尼孵育1h后加入PMA再共同孵育1h;5：曲马多孵育1h后加入PMA再共同孵育1h。3