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时间:2018-07-22
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1、临床医学检验技师考试辅导《微生物检验》 第十八章 病原性球菌及检验 本章考点:(掌握,熟练掌握) (1)概念 (2)生物学性状 (3)微生物学检查方法与原理 (4)临床意义(致病性、所致疾病) 普及共性,单记个性 生物学性状 形态与结构:革兰染色性,菌体形态,大小,排列状态,特殊结构。 培养特性:对气体需求,营养要求,最适pH值,最适温度,在培养基中的生长现象。 生化反应:特殊生化。 抗原: 分类: 致病性 致病物质 所致疾病 微生物学检查:针对生物学性状和致病性 一、葡萄球菌属 (一)概念 一群革兰阳性球
2、菌,因常堆聚成葡萄串状而得名。 (二)生物学特性 1.形态与结构:本属菌革兰染色阳性,呈圆球形,直径0.5~1.5/μm,不规则成堆排列,形似葡萄串状,在脓汁、肉浸液培养物中,可见单个,成对或短链排列。无鞭毛和芽胞,有些细菌能形成荚膜。 2.培养特性:需氧或兼性厌氧,营养要求不高,通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适pH为7.4,最适温度为35℃~37℃。 在普通琼脂平板上经35℃24~48h培养,可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落,直径为2~3mm。可产生不同的脂溶性色素,如金黄色、白色、柠檬色色素。 在血琼脂平板上,几乎所有的葡萄球菌
3、可产生α、β、γ和δ溶血素。对人致病的主要是α溶血素。 第10页临床医学检验技师考试辅导《微生物检验》 在液体培养基(普通肉浸液)中生长迅速呈均匀混浊状。 3.生化反应:触酶试验(+),对糖的发酵反应不规则,多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖,产酸不产气。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。 4.抗原:葡萄球菌水解后,用沉淀法可获得两种抗原,即蛋白抗原和多糖抗原。 (1)蛋白抗原:为完全抗原,有种属特异性,无型特异性。存在于葡萄球菌的表面,结合在细胞壁的粘肽部分,具有抗吞噬作用,称葡萄球菌A蛋白(SPA)。
4、 (2)多糖抗原:是半抗原,具有型特异性,有三种:①A型多糖抗原;②B型多糖抗原;③C型多糖抗原。 5.分类 6.抵抗力:对理化因素抵抗力强,耐热,耐干燥,耐高盐,是抵抗力最强的无芽胞细菌。 (三)致病性及临床意义 葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。 1)金黄葡萄球菌 第10页临床医学检验技师考试辅导《微生物检验》 2)表皮葡萄球菌是存在于皮肤的正常栖居菌,为医院感染的重要病原菌,它是导致血培养污染的常见细菌之一。 3
5、)腐生葡萄球菌是导致尿路感染的常见病原菌之一。 (四)微生物学检验方法与原理 1.标本采集:根据葡萄球菌感染所致的疾病不同,可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。(不同疾病采集不同标本) 2.检验方法及鉴定 (1)直接镜检:无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液(离心后取沉渣)涂片,经革兰染色后镜检,如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为:“找到革兰阳性葡萄状排列球菌,疑为葡萄球菌”。 (2)分离培养:血液标本(静脉血约5ml)注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养,迅速摇匀,以防凝固,置35℃,一般于24h后开始观察有无细菌生长,若均匀混浊,溶血及胶
6、胨状生长,则接种于血琼脂,进一步鉴定,若无细菌生长,于48~72h后自行观察(一般以7天为限),并接种血琼脂,以确定有无细菌生长。血液标本也可注入商品血培养瓶培养。 脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物,通常可直接接种血琼脂。35℃18~24h培养,可见直径2~3mm,产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。 尿液标本,必要时作细菌菌落计数。 粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板,经35℃18~24h培养,可形成细小菌落,48h后形成典型菌落。 (3)鉴定试验 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 触酶 + + + 血浆凝固酶
7、+ - - 甘露醇发酵试验 + - - 新生霉素敏感试验 S S R 第10页临床医学检验技师考试辅导《微生物检验》 报告:检出“XXX葡萄球菌” (4)耐药性检测:检测耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的表葡菌(MRSE),耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA),耐万古霉素的表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLS
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