药学毕业论文--高丽参的耳蜗毒性动物实验研究

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时间:2018-07-21

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1、高丽参的耳蜗毒性动物实验研究作者:杨楚胡吟燕郭维维江远仕翟所强【摘要】目的通过动物实验了解高丽参是否有耳毒性作用。方法以高丽参喂养组与庆大霉素注射组及正常对照组豚鼠进行比较,观察听性脑干反应阈值,了解其听功能的变化,结合耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描电镜观察耳蜗形态学变化,综合评价高丽人参有无耳蜗毒性。结果高丽参喂养组和正常对照组的ABR、毛细胞形态差异无显著性,和庆大霉素组差异有显著性。结论高丽参对豚鼠无明显的耳毒性作用。【关键词】高丽参耳蜗毒性动物Studyofcochleatoxicityofradixpanacisquinquefoliiwithanim

2、alexperiment【Abstract】ObjectiveToinvestigatethecochleatoxicityofradixpanacisquinquefoliibyanimalexperiment.Methods20guineapigsweredividedtofourgroups.Radixpanacis7quinquefoliifeedinggroup(includinghighdosegroupandlowdosegroup),Gentamicininjectiongroupandnormalcontrastgroupwerecompared.

3、ThemethodsincludedexaminingABRtofindoutthechangeofhearingfunctional,cochleasurfacepreparationforSuccinodehydrogenasedyeingandscanningelectronmicroscopetoobservethechangeofcochleamorphology,whichallusedtoestimatethecochleatoxicityofradixpanacisquinquefolii.ResultsTherewasn’tsignificantd

4、ifferencebetweenradixpanacisquinquefoliifeedinggroupandnormalcontrastgroupinABRandcochleamorphology,butthetwogroupswererespectivelysignificantdifferencecomparedtoGentamicininjectiongroup.ConclusionRadixpanacisquinquefoliiisn’tevidencecochleatoxicityforguineapig.【Keywords】radixpanacisqu

5、inquefoliicochleatoxicityanimal7高丽人参原产于韩国,具有补气固脱的作用,是民间常用的补品,但临床中有一小部分人服用后出现耳鸣、耳聋。目前,国内外尚无此类研究报告,厂家也无该药对耳蜗毒性的说明。为了了解高丽人参是否有耳蜗毒性,本研究通过动物实验,并与庆大霉素进行比较,观察听性脑干反应阈值,了解其听功能的变化,结合耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描电镜观察耳蜗形态学变化,综合评价高丽人参有无耳蜗毒性。1材料和方法1.1动物分组红目白色豚鼠20只,均为雄性,体重260~320g,耳廓反射正常。随机分4组,每组各5只:(1)高丽人参低剂量组8

6、g/(kg·d);(2)高丽人参高剂量组16g/(kg·d)。每天经口喂服高丽人参煎剂1次,连续14天。药物煎制方法:高丽人参切片冷水浸泡2h,煮沸后文火2h,取液,2次煎液浓缩成18.4g/10ml,存放冰箱。(3)庆大霉素对照组:100mg/(kg·d),大腿内侧肌肉内注射,每天1次,连续14天。(4)另设一正常对照组。1.2听功能测试每组动物用药前,停药后24h和7天后活杀前均行ABR的阈值测试。用HISSMARTEP2.22WORKSTATION记录ABR。选择交替短声click刺激,刺激重复率21.1次/s,平均叠加次数512,扫描时间10ms,滤波带宽:

7、100~3000Hz,记录电极置于颅顶,参考电极置于刺激侧耳垂,地线接对侧耳垂,耳机距外耳道口3cm。1.3形态学观察7标本制作方法:动物连续给药14天,停药7天后进行听功能检查后断头处死,每组取一只做电镜标本,日本SEM-800扫描电镜观察,其余均行耳蜗铺片,蜗管内灌注SDH作用液染色,固定,解剖显微镜下剥去耳蜗骨壳,去除螺旋韧带和前庭膜,将耳蜗分段制成耳蜗铺片,进行光镜观察及毛细胞记数。毛细胞记数从钩端开始,连续观察16个视野,记录毛细胞的缺失数及各组实测的外毛细胞总数。判断毛细胞的缺失标准是:毛细胞的轮廓不清或消失无蓝色颗粒。1.4统计学方法ABR阈移值及

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