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时间:2018-07-21
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1、培养基及其制备方法1、营养肉汤培养基胨10g肉浸液1000ml氯化钠5g取胨与氯化钠,加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。2、营养琼脂培养基照上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。3、虎红琼脂培养基胨5g虎红(四氯四碘荧光素)0.0133g葡萄糖10g(或0.133%虎红溶液10ml)磷酸二氢钾(KH2PO4)1g琼脂15~20g硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g水1000ml除葡萄糖、虎红外,取上述成分,混合,加热溶化后,
2、滤过,加入葡萄糖、虎红,分装,115℃灭菌30分钟。4、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨10g琼脂15~20g酵母浸出粉5g水1000ml葡萄糖20g除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热融化后,滤过,加入葡萄糖,分装,115℃灭菌15分钟。5、胆盐乳糖培养基(BL)胨20g牛胆盐1.3g乳糖5g(或去氧胆酸钠0.25g)氯化钠5g水100ml磷酸氢二钾(K2HPO4)4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4)1.3g除乳糖、牛胆盐外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐,分装,115℃灭菌30分钟。6、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)
3、营养琼脂培养基100ml2%曙红溶液2ml20%乳糖溶液 5ml0.5%亚甲蓝溶液1.3~1.6ml取营养琼脂培养基,加热融化后,冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,摇匀,倾注平皿。7、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨20g1%中性红溶液2.5ml乳糖10g琼脂15~20g牛胆盐5g水1000ml氯化钠5g除乳糖、1%中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,加入琼脂,加热融化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。8、三糖铁琼脂培养基(TSI)胨20g硫酸亚铁0.2g牛肉浸出粉5g硫
4、代硫酸钠0.2g乳糖10g0.2%酚红溶液12.5ml蔗糖10g琼脂12~15g葡萄糖1g水1000ml氯化钠5g除三糖、0.2%酚红溶液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,加入琼脂,加热融化后,滤过,再加入其余成分,摇匀,分装,115℃灭菌30分钟,制成高底层(2~3cm)短斜面。9、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB)胨5g硫代硫酸钠30g牛胆盐1g水1000ml碳酸钙10g取上述成分,混合,微温使溶解,121℃灭菌20分钟。临用前,取上述培养基,每10ml中加入碘溶液(取碘6g与碘化钾5g,溶于20ml水中)0.2ml和0.1%亮绿溶液0.1ml,混
5、匀。10、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS)胨5g硫代硫酸钠8.5g牛肉浸出粉5g 1%中性红溶液2.5ml乳糖10g 0.1%亮绿溶液0.33ml牛胆盐8.5g 琼脂20g枸橼酚钠8.5g水1000ml枸橼酸铁铵1g除糖、指示剂、琼脂外,取上述成分混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,滤过,加入琼脂,加热融化后,121℃灭菌20分钟,再加入其余成分,摇匀,冷至约60℃,倾注平皿。11、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基胨10g牛肉浸出粉3g氯化钠5g琼脂15~20g十六烷三甲基溴化铵0.3g水1000ml除琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌
6、后为7.5±0.1,加入琼脂,加热熔化后,分装,121℃灭菌20分钟,冷至约60℃,倾注平皿。12、亚碲酸盐肉汤培养基临用前,取灭菌的营养肉汤培养基,每100ml中加入新配制的1%亚碲酸钠(钾)溶液0.2ml,混匀,即得。13、卵黄高盐琼脂培养基胨6g10%氯化钠卵黄液100ml牛肉浸出粉1.8g琼脂23g氯化钠30g水650ml除10%氯化钠卵黄液外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.6±0.1。121℃灭菌20分钟,待冷至约60℃,以无菌操作加入10%氯化钠卵黄液,充分摇匀,倾注平皿。10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋一个,以无菌操作取出卵黄,放入10%灭菌氯化钠溶液
7、100ml中,充分振摇,即得。14、甘露醇高盐琼脂培养基胨10g1%酚红溶液2.5ml牛肉浸出粉1g琼脂15~20g甘露醇10g水1000ml氯化钠75g除甘露醇、1%酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,加入琼脂,加热融化后,滤过,分装,115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。15、蛋白胨水培养基胰蛋白胨10g水1000ml氯化钠5g取上述成分混合,加热融化,调节pH值
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