选修三知识点(难点)new

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1、基因工程•基本工具•工具酶•限制(性核酸内切)酶•[限制酶切割位点]•使用[同一种限制酶]切割[质粒]和[含有{目的基因}的DNA]•DNA连接酶•用[DNA连接酶]处理，形成重组载体•酶切产物用[DNA连接酶]连接后，两个DNA片段连接结果有[3]种(目的基因＋目的基因，目的基因＋质粒，质粒＋质粒)•载体(重组载体)：质粒或病毒•用DNA连接酶将切割产物连接，构成[重组质粒(重组DNA)]并将其导入到受体菌种•载体一般选用[质粒]、[病毒]，质粒的形状成[环状]•常用作基因工程载体的是[质粒(或病毒)]•基因工程中的载

2、体化学本质是[DNA]；细胞膜载体化学本质是的[蛋白质]•兼容性•★人的基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是[DNA的结构相同]统一性•★人体的生长激素基因能在细菌提内成功表达是因为[共用一套(遗传)密码子]•基因的表达与复制•基因的表达•真核生物与原核生物的基因结构有所不同，其原因是[编码区是间断的不连续的]•若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是[不含有内含子片段]•基因的复制，PCR技术•PCR遵循的原则是[碱基互补配对原则•原料技术过程原料酶PCRDNA复制模板DNA引物4种游离的

3、脱氧核苷酸耐高温的DNA聚合酶cDNA构建RNA反转录成DNA模板RNA4种游离的脱氧核苷酸逆转录酶•★PCR扩增需在一定的缓冲液中进行，反应体系中应加入模板、引物、[4种游离的脱氧核苷酸]作为原料，以及[耐高温的DNA聚合]酶•★PCR与生成cDNA时所加反应物不同的是模板cDNA、引物、[耐高温的DNA聚合]酶•高温解旋•★通过控制[温度]条件使DNA复制在体外反复进行温度和pH•其他条件•★PCR技术的必须条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少需要三个条件，即[液体环境]、[适宜的温度]和[酸碱度]其

4、他相关技术•植物组织培养相关†•科研人员常用[植物组织培养]方法保持转基因的优良性状•将转入的抗盐基因的烟草细胞培养城完整的植株需要用[植物组织培养]技术•目的基因导入棉花首体细胞后，培育成抗虫棉的过程所采用的技术是[植物组织培养]•将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用[植物组织培养技术]•育种相关§•与诱变育种比较，基因工程方法的明显优势是[基因工程产生的变异是定向的]•由于玉米赖氨酸较少，科学家采用了[基因工程]技术，将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米体内•基因工程应用：蛋白质工程•蛋白质工程的目标是根据

5、对蛋白质[功能]的特定需求，对蛋白质进行分子设计，根据中心法则便可以改造天然蛋白质•★所获得的产品是[人类需要的蛋白质(或自然界不存在的蛋白质)]•★蛋白质工程中直接操作的对象是[基因结构(或基因)]基本步骤•第一步：获取目的基因要获得目的基因，可采用[从基因文库提取]：[基因组文库]、[cDNA文库(反转录)][PCR扩增][人工合成]等方法•cDNA文库，反转录•★若已获取目的基因的mRNA，可通过[反转录]获取目的基因人工合成•cDNA文库的构建过程是[反转录]•第二步：基因表达载体的构建•启动子•[启动

6、子]位于基因的首端•是[RNA聚合酶]识别和结合部位•为确保基因转录，结构A上应具有[RNA聚合酶]结合位点•终止子•[终止子]位于基因的尾端•目的基因•标记基因•其作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上的[标记基因]的表达•第三步：将目的基因导入受体细胞•转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程•将目的基因导入受体细胞的方法基因工程中常用的受体细胞有植物细胞、动物细胞、微生物细胞•植物细胞：农杆菌转化法

7、、基因枪法、花粉管通道法•抗虫棉培育，目的基因导入棉花受体细胞采用最多的方法是[农杆菌转化法]•动物细胞(受精卵)：显微注射法•将载体导入受精卵常用的方法是[显微注射法]•动物受体细胞使用受精卵，原因是[卵细胞较大、全能性较高]•微生物细胞(原核生物、大肠杆菌)：Ca2+处理成为感受态细胞，吸收DNA分子•导入受体细胞的方法－原因分析•动物受体细胞使用受精卵，原因是[卵细胞较大、全能性较高]•目的基因导入叶绿体DNA中可以避免“基因污染”，原因是：[叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递在下一代中显现出来]•

8、增殖•重组质粒转化到大肠杆菌的目的是[大量复制目的基因]•筛选•重组DNA分子成功导入受体细胞的频率[低]，所以在转化后通常需要进行[筛选]操作•为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入[{某抗生素}]•第四步：目的基因的检测和表达•分子检测•是否插入基因组DNA：[DNA分子杂交技术](同位素标记基因探针、