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时间:2018-07-20
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1、www.ks5u.com第四章种群探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化课前准备探究培养液中酵母菌种群数量动态变化的活动,在探究过程中涉及多项实验操作技能,包括用血细胞计数板进行酵母菌细胞计数、通过使用比浊计测定浑浊度、尝试依据测量数据建立种群数量变化的数学模型,而学生在活动中又受到时间等各种因素的限制,因此在活动进行之前必须做好充分的准备。学生准备:1.了解酵母菌:酵母菌是一种既能进行出芽生殖又能进行有性生殖的单细胞真核生物,生长的最适宜温度在20℃~30℃之间,酵母菌能在pH值为3~7.5的范围内生长,在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖,大约每1.5~2小时增殖一代。由于酵母
2、菌的生长周期短,增殖速度快,是研究种群数量的增长规律以及种群内部和外部因素对种群个体数量影响的良好实验材料。酵母菌的种类很多,来源丰富,最简单的方法是使用食品类商店出售的用于发面或制酒的高活性干酵母作为菌种。2.了解血细胞计数板:血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,它的规格有两种,一种叫16×25型,另一种叫25×16型。以16×25型为例,在血细胞计数板的中央有两个平面台,每个平面台各有一个含9个大格的方格网,中央大格叫大方格。将其放大,可见它含16中格,将每一中格放大,可见25个小格,所以每一个大格共有400个小格。一般取大格中的左上→右上→右下→左下4个中格计数
3、,共计数100个小格。每一个大方格的边长为1mm,面积为1mm2,每一个小格的边长为0.05mm,面积为0.0025mm2,盖上盖玻片后,载玻片和盖玻片之间的高度为0.1mm,所以大格的容积为0.1mm3(已知1mL=1cm3=1000mm3),每一个小格的容积为0.00025mm3,0.00025mm3×400=0.1mm3。推导酵母菌细胞总数计算公式:①每mL酵母菌细胞个数=(所数100个小格中的细胞总数÷100)×400×104×稀释倍数。②试管内酵母菌细胞总数=每mL酵母菌细胞个数×10教师准备:材料:酵母菌贮用培养液,无菌葡萄糖溶液,无菌水。用具:血细胞计数板,盖玻片,有螺旋盖的
4、试管,滴管,移液管,试管架,记号笔,直尺,坐标纸,比浊计,显微镜。活动过程活动流程学生活动教师活动教学意图一、提出问题在封闭的环境中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?养分会影响酵母菌种群的数量吗?温度会影响酵母菌种群的数量?等等。针对学生提出的各种假设,教师引导学生思考如何设计实验。激发学生对酵母菌种群数量变化的好奇,提出各种问题并作出假设。二、作出假设酵母菌种群的数量随培养时间的延长而呈S型增长,或酵母菌种群的数量随培养时间的延长而呈J型增长等。三、设计实验(1)制备酵母菌贮用培养液:取洁净的试管若干支平均分成A、B两组,A组为实验组,装培养液10mL,酵母菌母液0.1mL;B组为对照
5、组,装培养液10mL,将A、B组试管置于28℃恒温箱中培养。让学生自己设计实验的程序,并设计记录实验数据的表格。(2)定时取样计数:连续7天,在每一天相同时间用血细胞计数板对一定量的酵母菌贮用培养液进行细胞计数,并且用比浊计测定浑浊度。将数据记录在类似以下表格内。计数试管第0天第1天……第7天A0B0A1B1A7B7样品1样品2总数平均数稀释倍数平均×稀释倍数浑浊计读数估算数(3)数据处理,建立数学模型(画坐标曲线)(4)结果分析与讨论设计实验时教师先请学生思考实验的影响因素有哪些?如何才能使测得的数据最接近真实值?等问题。活动流程学生活动教师活动教学意图四、实验过程1.酵母菌贮用培养液制
6、备了解酵母菌生长所需的环境:培养基,温度,PH,无菌等条件。酵母菌的培养可以选用多种培养基,如麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基等,本次活动选用马铃薯葡萄糖培养基,此培养基的原料价格低廉,一年四季均可买到,培养效果好。材料:马铃薯(去皮)200g,葡萄糖20g,大烧杯量取1000mL蒸馏水,酵母菌母液(由少量活性干酵母溶解于适量35℃温水制成)。用具:各容量烧杯,1000mL水浴锅,试管,量筒,10mL移液管,1mL移液管,滴管,标签,纱布,牛皮纸,玻璃棒,天平,高压蒸汽灭菌锅,恒温箱等。(1)配制马铃薯葡萄糖培养基:将去皮马铃薯,切成约2cm2的小块,放入盛有1000m
7、L水的水浴锅煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底。30min后,用双层纱布过滤,过滤时用玻棒引流,取其滤液加葡萄糖,再补足水至1000mL,自然pH。(2)分装:按预先设计将试管分为A、B两组进行分装。每次用10mL移液管吸取10mL培养液到试管(注意不要将培养液沾在试管口和试管上段以免引起污染),待分装完毕,每支试管加塞后把试管扎成捆后,包一层牛皮纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。然后用贴上标签,注明培养基的名称、日期等
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