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1、人胎盘羊膜上皮细胞的分离鉴定及多向诱导分化_图文中国组织工程研究第21卷第9期2017–03–28出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchMarch28,2017Vol.21,No.9www.CRTER.org人胎盘羊膜上皮细胞的分离鉴定及多向诱导分化，27·研究原著·李萍12，王久存1，陆瑶2，许惠利2(1上海复旦大学生命科学学院现代人类学教育部重点实验室，上海市200433；2上海市干细胞技术有限公司，上海市200051)引用本文：李萍，王久存，陆瑶，许惠利.人胎盘羊膜上皮细胞的分离鉴定及多向
2、诱导分化[J].中国组织工程研究，2017，21(9):1420-1425.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.020ORCID:0000-0001-9713-3915(李萍)文章快速阅读：文题释义：人羊膜来源干细胞：包括人羊膜上皮细胞、人羊膜间充质干细胞，表达多种干细胞标记物，具有较全面的多分化潜能，并且因具有“无致瘤性、免疫原性低、安全性高”等诸多胚胎干细胞和成体干细胞所不具备的优势和特点。27人羊膜上皮细胞：具有表达多种胚胎干细胞标记物的特点和较全面的多向分化潜能，随后Miki等研究证实了其向3胚层
3、分化的潜能，除表达胚胎干细胞表面抗原SSSEA-3和SSSEA-4，肿瘤抗性基因TRA1-60和TRA1-81之外，近来发现人羊膜上皮细胞还表达多潜能干细胞的转录因子，例如Oct-4、Sox-2、Nanog和REX-1等及其他抗原，不表达CD34、SSSEA-1、CD133，弱表达c-kit(CD117)和CC趋化因子受体(CRR4)。摘要背景：人羊膜上皮细胞来源稳定，正逐渐成为广受关注的再生医学种子细胞来源。目的：建立人羊膜上皮细胞体外分离培养、成脂、成软骨、成骨诱导分化的方法。方法：通过胰蛋白酶消化法从人胎盘羊膜中分离羊膜上皮细胞，进行体
4、外培养与鉴定，观察培养12d内的细胞生长曲线。取P1代羊膜上皮细胞，分别进行成脂、成软骨、成骨诱导，以常规培养细胞为对照，诱导16d后，分别进行油红O染色、Masson染色及碱性磷酸酶染色，同时采用荧光定量PCR检测诱导过程中成脂转录因子、Ⅱ27型胶原蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶mRNA表达变化。结果与结论：①从人羊膜中分离出的羊膜上皮细胞，免疫荧光检测表达上皮细胞标记物CK19；②P1代细胞具有较强的分裂增殖能力，P2细胞与P1相比增殖能力略有下降，P3细胞增殖能力最差；③羊膜上皮细胞经成脂、成软骨、成骨诱导后，油红O染色有红色脂滴，Mass
5、on染色有亮蓝色软骨基质，碱性磷酸酶染色有红褐色钙结节；随着诱导时间的延长，成脂转录因子、Ⅱ型胶原蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶表达量升高；④结果表明，采用酶消化法可从人羊膜中分离得到羊膜上皮细胞，羊膜上皮细胞可向脂肪细胞、成软骨细胞、成骨细胞分化。关键词：干细胞；分化；羊膜上皮细胞；诱导分化；成脂细胞；成骨细胞；成软骨细胞主题词：羊膜；上皮细胞；成脂分化；组织工程Humanamnioticepithelialcells:isolation,identificationandmulti-directionaldifferentiation27Li
6、Ping1,2,WangJiu-cun1,LuYao2,XuHui-li2(1MinistryofEducationKeyLaboratoryofContemporaryAnthropology,LifeScienceInstitute,FudanUniversity,Shanghai200433,China;2ShanghaiStemCellTechnologyCo.,Ltd.,Shanghai200051,China)AbstractBACKGROUND:Humanplacentaisastablesourceforhumanamniot
7、icepithelialcells,whichisbecomingacellsourceintheregenerativemedicinethatattractswidespreadattentions.OBJECTIVE:Toestablishthemethodofisolation,culture,andadipogenic,chondricandosteogenicdifferentiationofhumanamnioticepithelialcells.1420P.O.Box10002,Shenyang27李萍，女，1986年生，安徽
8、省合肥市人，汉族，2009年华东师范大学毕业，复旦大学在读硕士，主要从事免疫学、干细胞方面的研究。中图分类号:R394.2文献标识码:B文章编号:2095-4344
