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1、RNA干扰在哺乳动物中的应用RNA干扰在哺乳动物中的应用RNA干扰在哺乳动物中的应用42畜禽生产HeilongjiangAnimalScienceandVeterinaryMedicineNO.82005白质水平.最好在断奶期间使用鱼粉,乳清粉,血浆蛋白粉等动物性蛋白原料和易消化的膨化饲料.2.2.4饲喂方法逐渐过渡为避免饲喂量不足或过多加重应激,断奶当天不喂料,可口服补盐液(DRS)2次.在断奶后4—5d要限饲,坚持夜间补饲,少喂多餐,一昼夜喂6—8次,以后逐渐减少饲喂次数,日喂料量大约为体重的1/20,并供应充足的清洁水,经
2、4—5d的限饲后再逐渐增加词喂次数.2.3补加矿物质元素在早期饲料中添加1000—25O0mg/kg的氧化锌,1000ms/kg亚硒酸钠维生素E粉剂,断奶前5—7天仔猪每头补铁150—200mg.2.4添加抗生素药物,维生素及益生素添加适量的抗菌素(如土霉素粉,四环素,磺胺类等),维生素(如维生素C,烟酸等),氨基酸和益生素等和添加2%一3%粒度在100—500目的饲用沸石.3发生应激后的技术措施(1)发生腹泻后,采用世界卫生组织推荐的口服补液盐(DRS),给仔猪饮用补液,同时加入适量抗菌药更好,让小猪自饮,如不能自饮应灌服.同
3、时肌肉注射5%恩诺杀星注射液,按体重0.1mL/kg,2/d,连用3d.(2)出现僵猪后可按每千克体重用大黄苏打1片(含量0.3g),最多不超过10片,研末拌饲料喂服,每日2次,连服3d健胃;与此同时,结合用山楂,麦芽,神曲各50g(1次用量),煎汁拌潲喂,每日2次,连服5d化食.(3)当猪群发生水肿病时,可紧急接种仔猪水肿病油乳剂三价灭活苗,按体重5万IU/kg,肌注链霉素,配合地塞米松5—10mL/头,肌肉注射,每8小时1次,连用2—3d.(4)发生咬尾或咬耳现象时,要加强管理,及时断尾,降低饲养密度,改善饲养环境,同时应注
4、意仔猪断奶混合料或微量元素等添加剂的科学性供给和使用.有条件的猪场,可以每天定时定量向圈舍投喂青饲料以供仔猪叼食.(007)RNA干瓤在gili~L动物【l】硇应用郑茂波(哈尔滨学院生命科学与化学学院,黑龙江哈尔滨150086)中图分类号:$814.8文献标识码:B文章编号:1004—7034(2005)08—0042—02从2001年《Nature)杂志上首家报道在哺乳动物培养细胞中通过siRNA成功诱导了特异性靶基因表达沉默后,RNA干扰技术就作为一项特异性基因沉默的有效工具从低等生物成功进军哺乳动物领域.2003年Rubi
5、nsonDA等又在NatureGe—netics上报道用病毒系统在原代哺乳动物细胞,干细胞和转基因小鼠上都取得了RNA干扰成功,更大大扩展了这项技术的应用范围.l高通量的研究基因功能在后基因组时代,需要大规模高通量的研究基因的功能,由于RNAi能高效特异的阻断基因的表达,因而RNAi成为研究基因功能的很好的工具.研究者将线虫三号染色体上2232个基因对应的dsRNA合成出来,并注射到线虫性腺内,然后观察子代细胞分裂时出现的异常表型,结果发现了133个基因与细胞分裂异常有关.其中104个基因以前没有发现有这种功能.在另外一项研究中
6、,线虫一号染色体上的2416个基因对应的dsRNA被构建到细菌文库中,然后将细菌喂给线虫,观察形态学的异常,异常的运动,性别比例的变化,不孕的情况,结果将于这些表型有关的基因从70个增加到178个.与传统的基因敲除技术相比,这一技术具有投入少,周期短,操作简单等优势,近来RNAi成功用于构建转基因动物模型的报道日益增多,标志着RNAi将成为研究基因功能不可或缺的工具.用RNAi技术可以大规模研究基因功能.收稿日期:2005—04—05作者简介:郑茂波(1972一),男,讲师,硕士研究生.2基因敲除在线虫的体内外试验中,RNAi都
7、能达到基因敲除的结果,从而成为研究这些基因功能的良好工具.对于哺乳动物,RNAi能在体外培养的细胞达到基因敲除的效果,对于一些敲除后小鼠在胚胎时就会死亡的基因,可以在体外培养的细胞中利用RNAi技术研究它的功能.由于RNAi能高效特异的阻断基因的表达,它成为研究信号传导通路的良好工具.在线虫体内,胰岛素和受体结合后可以活化DSOR1,它是MEK的类似物,DSOR1活化后可以激活ERKA,它是ERK的类似物.用以DSOR1为靶目标的dsRNA可以阻断DSOR1的表达,虽然总的ERKA的表达不受影响,但由于DSOR1的表达被抑制,因
8、而胰岛素刺激后ERKA不能活化.RNAi还被用来研究在发育过程中起作用的基因,如可用RNAi来阻断某些基因的表达,来研究它们是否在胚胎干细胞的增殖和分化过程中其起着关键作用.3研究信号传导通路的新途径联合利用传统的缺失突变技术和RNAi技术可以很容易地确定复杂的
