发酵种子扩大培养

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1、TheDevelopmentofInoculaforIndustrialFermentation第一节种子扩大培养的目的与要求第三节种子制备实例第二节种子制备的技术概要发酵工程第四章种子扩大培养种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。第一节种子扩大培养的目的与要求种子扩大培养的概念:发酵工程第四章种子扩大培养种子扩培的目的接种量的需要菌种的驯化缩短发酵时间、保证生产水平种子的要求：总量及浓度能满足要求生理状况稳定，个体与

2、群体活力强，移种至发酵后，能够迅速生长无杂菌污染发酵工程第四章种子扩大培养Itisessentialthatthecultureusedtoinoculate(接种)afermentationsatisfiesthefollowingcriteria(标准):1.Itmustbeinahealthy,activestatethusminimizingthelengthofthelagphaseinthesubsequentfermentation.2.Itmustbeavailableinsufficientlylargevolumestoprovidean

3、inoculumofoptimumsize.3.Itmustbeinasuitablemorphological(形态学的)form.4.Itmustbefreeofcontamination.5.Itmustretainitsproductformingcapabilities.发酵工程第四章种子扩大培养第二节种子制备的技术概要一、种子制备的过程实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此形象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车

4、间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。发酵工程第四章种子扩大培养Aseptic:无菌的,无毒的lyophile亲液胶体;亲液物发酵工程第四章种子扩大培养发酵工程第四章种子扩大培养二、实验室阶段1、培养物选择的原则目的：种子扩培到一定的量和质，根据菌种的特点最终的培养物可分为两类：对于不产孢子和芽胞的微生物——获得一定数量和质量的菌体对于不产芽孢和孢子的微生物，实验室阶段的种子扩培最终是获得一定数量和质量的菌体，如谷氨酸的种子培养。发酵工程第四章种子扩大培养获得一定数量和质量的孢子菌丝体培养步骤少，因而更容易获得量和质稳定的种子，但操作繁琐。对于产孢

5、子的微生物获得一定数量和质量的菌丝体便于操作，但需要更仔细的控制。发酵工程第四章种子扩大培养2、培养基选择的原则培养基的选择应该是有利于菌体的生长，对孢子培养基应该是有利于孢子的生长。在原料方面，实验室种子培养阶段，规模一般比较小，因此为了保证培养基的质量，培养基的原料一般都比较精细。发酵工程第四章种子扩大培养3、起始接种物的传代问题细菌保藏斜面→活化斜面产孢子保藏→母斜面→子斜面目的：使菌种的传代次数尽可能的少。发酵工程第四章种子扩大培养母瓶：活化、纯化，使保藏菌种生长，并去处变异株。所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。子瓶:大量繁殖，得到大量孢子。

6、接种：①从母斜面上点接种，选取生长好的单菌落②接种时密一点，得到大量的孢子。孢子培养时注意湿度，子斜面使用一般不超过1个月孢子培养发酵工程第四章种子扩大培养三、生产车间阶段1、培养物的选择原则在生产车间阶段，最终一般都是获得一定数量的菌丝体。缩短发酵时间有利于获得好的发酵结果菌丝体比孢子要有利：发酵工程第四章种子扩大培养2、培养基选择的原则目的：获得一定数量和质量的菌体，因此培养基的选择应首先考虑的是有利于孢子的发育和菌体的生长.在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于发酵培养基，这有两个方面的原因:一是成本二是驯化发酵工程第四章种子扩大培养例：柠

7、檬酸发酵以蔗糖为原料成分斜面种子罐发酵麦芽汁麦汁蔗糖2.5-5%20%NH4NO30.225%0.11%K2HPO40.03%MgSO4.H2O0.025%0.025%KCl0.015%琼脂2%发酵工程第四章种子扩大培养薯干粉成分斜面种子罐发酵麦芽汁麦汁薯干粉10%22-28%(NH4)2SO40.5%琼脂2%发酵工程第四章种子扩大培养3、发酵级数的确定谷氨酸：三级发酵一级种子（摇瓶）→二级种子（小罐）→发酵青霉素：三级发酵一级种子（小罐）→二级种子（中罐）→发酵一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数发酵工程第四章种子扩

8、大培养Aeration:通风,通气发酵工程第四章种子