细胞工程复习资料最终版

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1、细胞工程是指以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术细胞工程的应用（在现代生物技术中的地位）细胞工程是现代生物技术的基础。细胞是大部分生命体存在的基本结构，而现代生物技术（如基因工程蛋白质工程等）无不是对细胞或细胞的物质进行改造而达到获取目的产物影响生物什么状态的目的，在这里，细胞都是这些技术开展的平台和基础无菌技术灭菌方法：物理灭菌法、化学灭菌法、使用抗生素。物理方法：干热、湿热、射线/微波/紫外线处理、过滤、离心沉淀、

2、大量无菌水冲洗等。化学方法：各种灭菌剂。抗生素的使用：青霉素、链霉素、卡那霉素、制霉菌素等，主要用于细胞培养过程中细胞冷冻方法：1.缓慢冷冻法——将处于0°C或其他预处理温度的材料以1~2°C/min的降温速度从起始温度降到-100°C，稳定1h后投入液氮中保存或以此降温速度连续降温至-196°C。按1mL每安瓿的量分装细胞悬液，在火焰下将安瓿封口。将封口的安瓿放入慢冻机内，添加保护剂的细胞悬液按照一定梯度降低温度进行缓慢冷冻。当温度在-25°C以上时，可以按照1~2°C/min的梯度降温；当温度达-25°C以下时，可以按

3、照5~10°C/min的梯度降温。2.预冷冻法——包括两步冷冻、逐级冷冻两种，前者是将预处理后的材料先通过缓慢冷冻法降温至-40°C，保存一段时间（约30min）后，再投入液氮中保存。后者将经过预处理的材料先制备成不同温度等级的溶液，如-10°C、-15°C、-23°C、-35°C及-40°C，并在每级温度中停留一定时间（4~6min），然后将材料投入液氮中保存。3.快速冷冻法——将材料从0°C或者其他预处理温度直接投入液氮中保存。关键就是利用高速降温越过冰晶增长的问下哦温度区，使细胞内来不及形成大小可以致死细胞的冰晶。细

4、胞培养的操作方式1.分批式培养：是指细胞和培养基一次性加入到培养容器或生物反应器内进行培养，在培养过程中培养液体积不变，不添加营养成分，待细胞增长和产物积累到适当的时间，一次性收获细胞、产物和培养液的培养方法。2.流加式培养：是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加一种或多种营养成分的培养方法。3.半连续式培养：又称重复分批式培养或换液培养。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间从中取出部分培养液或者细胞，剩余的细胞作为种子，再用新的培养液补足到原有体积，使生物反应器内的总体积不变。4.连续式培养：在细胞达最大密度之前，

5、一定速度向生物反应器连续添加新鲜培养基，同时含有细胞的培养液以相同的速度连续从生物反应器流出，以保持培养体积恒定的培养方式。5.灌流式培养：是把细胞和培养基一起加入生物反应器后，在细胞增长和产物形成过程中，不断地将部分培养液取出，同时又连续不断地补充新的培养液植物无性繁殖过程中器官发生方式：1.不定芽型2.器官型3.器官发生型4.胚状体发生型5.原球茎型原球茎是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官，可萌发成苗植物组培基本过程：1.准备实验器材和培养基2.采集植物材料3.外植体消毒4.接种外植体5.控制条件培

6、养及继代培养6.组培苗的炼苗移栽植物组培操作中的注意事项一，玻璃化：试管植物的半透明畸形现象，又称过度水化现象。二，褐变：主要是由多酚氧化酶引起的酶促褐变。1.外植体的选择与处理：选生长旺盛者，灭菌与切割时要尽可能减小损伤2.培养条件：如酸性环境下通常不易褐变3.细胞的筛选和材料的预处理：剔除易褐变的细胞；易褐变的外植体可在黑暗条件下培4.养一段时间，再连续转移几代，可减轻褐变5.加入抑制剂：抗氧化剂等6.加入吸附剂：如活性炭、聚乙烯吡咯烷酮等。三，微生物污染：外源菌和内源菌1.加入抗生素2.严格的无菌操作3.外植体的预处

7、理及消毒方法的改进4.使用间隙消毒法处理体细胞胚又叫胚状体，是指立体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物人工种子又称合成种子或体细胞种子，将植物离体培养产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒植物脱毒方法：物理、化学和生物3种方法植物脱毒鉴定方法1.直接检测法2.指示植物法3.电镜法4.抗血清检测法5.分子检测技术试管动物培育过程1.精子采集与体外获能，卵子采集与成熟培养2.体外受精3.重组胚激活与体外培养4.胚胎移植5.体内发育、出生超数排卵技术是指在发情周期的适当时间，

8、用人工方法促使动物有更多的卵泡发育、成熟并排卵的一项技术胚胎分割是指借助显微操作仪切割早期胚胎成多等份，再移植给受体，从而制造同卵多仔后代的技术，是一种广义上的动物克隆技术试管婴儿是指将卵子与精子取出在体外受精，培养发育成早期胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿，也就是采用体外受精联合胚胎移植技术培育的