各款荧光定量pcr仪的性能比较

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1、各款荧光定量PCR仪的性能比较本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作，用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪，如ABI5700，ABI7700，ABI7000，ABI7300，ABI7500，MJopticon，MJopticon2，bio-radICycler，LightCycler1.5，roter-gene3000，StratageneMx3000P，line-gene等等。这种仪器各有各的特点，但都存在不足之处。ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多，成系列，但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光，

2、因而已经退出历史舞台，尤其是ABI7700，不但很贵，而且采用苹果机电脑，使用很不方便。ABI7000目前也已经淘汰，我用的这台仪器老出问题，曲线极不光滑，但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好，在ABI7500上曲线也很光滑，所以，本人估计是ABI7000设计上有不足之处。而且卤钨灯特别容易坏，在南方，我们实验室平均5个月换一个，配件容易坏，后续使用成本就会高一些。现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。另外我个人感觉AB

3、I7900（ABI公司第二代产品）有些华而不实，价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的，硬件上跟ABI7700差不了太多，但性能指标还不如ABI7500（ABI公司第三代产品），硬件设计上也不如ABI7500合理。所以这个型号的仪器，谁买了，用的时候会不呼上当。ABI7500是ABI公司最成功的产品，各方面性能都不错，虽然加热模块还是有一些边缘效应，但使用中央的孔位效果可以得到保证，在96孔板使用中间的48个孔位，结果都能得到保证。总的来说，ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的，其仪器在科研上还是可以用的，但由于硬件设计上

4、的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，并且占用了一个检测通道。国内的试剂厂商都不加ROX染料，科研用户一般也不使用，所以其检测的准确性和重复性还是很难保证的，尤其浓度较低的模板进行检测时效果不佳，偏差会很大。罗氏Roche的LightCycler以运行速度快而著称，在国内市场占有率最高，其设计保证了临床诊断的准确性，又充分考虑了科研功能。但本人最初使用时老出问题，有时候阳性曲线做不出来，后来发现这跟其独特的毛细管设计有关系，因为毛细管很细，所以反应液在毛细管中的对流交换非常不畅，没有充分混匀时就加入毛细管会影响反应的进行，当然，热

5、启动酶就不会有这方面的问题了。所以本人在操作时都特意将反应液混合充分后再加入毛细管，这样在后来的实验中就没有出现过问题。本人开始使用罗氏的仪器时最怕毛细管断裂，操作时特别担心，熟练以后，规范使用随机赠送的操作配件，也没见毛细管断过。而且最重要的是，罗氏的仪器稳定性非常好，灵敏度明显比其它仪器高，这也许跟毛细管和其检测元件有关系，检测重复性也非常好，所得定量结果可信度高。本人所使用的罗氏LightCycler1.5三四年了也没出现硬件的故障。另外，采用毛细管最大的优点恐怕就是可以大量节省成本，因为目前只有毛细管这种反应装置才可以采用

6、10uL的反应体系而不影响试剂的检测灵敏度和稳定性，这样大大地节省了试剂的成本。同样用普通PCR反应管进行10uL体系的荧光定量实验，效果很差，而且明显灵敏度下降，检测结果不稳定。罗氏公司Roche推出的LightCycler2.0在原有基础上检测通道增加到六个，软件功能也更加丰富。据说最新推出的LightCycler480是目前全球最先进的荧光定量PCR仪，突破了传统技术的瓶颈，推出了不具边缘效应的高通量荧光定量PCR仪。具体没有用过，听说使用非常灵活。MJ的仪器总体上而言比较稳定，但检测灵敏度不高，功能单一，检测通道不多，运行

7、时间太长，一般一次实验要两个多小时。所谓的温度梯度功能在荧光定量PCR平台上一点用处都没有，这主要是由该技术的原理决定的，所以这个功能只是作秀了。伯乐的ICycler仪器也许是设计上的缺陷还是什么原因，同样的反应体系，在该仪器上进行实验时，阳性样本的扩增曲线荧光增量比较低，检测效果不好，所以在全国很少用户使用该仪器。伯乐的荧光定量PCR仪目前在国际上仍属低端产品，返修率太高。Line-gene仪器的使用比较方便，但返修率较高，不过厂家就在国内，售后服务非常及时。roter-gene3000跟罗氏公司的LightCycler有很多相

8、似之处，只是roter-gene在操作时比较麻烦，而且采用普遍反应管，光透性不好，影响了检测结果，这可以从其原始曲线上看出来，但该仪器的软件所表现的是对数曲线，把其原始曲线上的曲析不平掩盖了，其灵敏度不高，在进行微量检测时往往会得到大量假阴性结果。