液相色谱柱的故障诊断与维护

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1、液相色谱柱的故障诊断与维护（二）液相色谱柱的故障诊断与维护（二）宽峰*在进样口到柱或柱到检测器之间，使用细的短的连接管*保证所有的管路接头都使用正确*用小体积检测池*减少进样量Extracolumndispersionlookslikethis....Ononesystemwithonecolumn,thepeaksareniceandsharp.Onadifferentsystemorwithadifferentcolumnorchemist,theanalysislooksliketheoneonthe

2、right.Tubingisthenumberonecauseofthisbandbroadeningfromdispersion.Makesureyouareusingshort,smallidtubingbetweentheinjectorandcolumnandbetweencolumnanddetector,eliminatingasmuchadditionaldeadvolumeaspossible.Ifusingadifferentsysteminadifferentlab,donotbefoo

3、ledbythelengthofthetubingalone.ChecktheID!Makesureallconnectionsaremadewithmatchedfittings,aswewillseelater.Thisincludesunions,columnendfittings,andinjector/detectorfittings.Checktovolumeofthedetectorflowcelltomakesureitiscompatiblewiththecolumn.Smalleridc

4、olumnsrequiresmallerflowcellvolumesifyouwouldliketomaintaintheefficiencyoftheseparation.Makesureyourinjectionvolumeshavenotincreasedduetoasoftwareprogrammingerrorinthemethod.Checkthemicrolitersinjected.Alsocheckthesampleconcentrationtomakesureitisnot10or10

5、0timesmoreconcentratedthanyouthink,theattenuationwillgivethisoneaway.柱外体积效应的影响压力I.不进样时柱压连续升高-泵密封垫-流动相有颗粒-流动相溶解性-流动相的不稳定性(聚合)-形成柱死体积(与使用条件有关)II.进样时压力升高-样品有颗粒-样品在流动相中不溶-样品组分与固定相不兼容保留值漂移I.所有峰都向低保留值方向漂移（酸、碱、中性化合物）-键合相流失-流动相不稳定(可能性较小)-溶剂输送系统(流速变化)II.所有峰都向高保留值方向

6、漂移-在水/有机溶剂的混合体系中，有机溶剂含量减少-柱改变(可能性较小)-溶剂输送系统(流速变化)III.离子型化合物的色谱峰的保留值漂移-流动相中挥发性组分损失(离子强度,pH漂移)-柱改变(键合相或污染)保留值漂移I.与流动相有关的问题-使用新鲜的流动相  ?pH  ?电导  ?色谱性能测试II.与色谱柱有关的问题-测试新柱-用标准的测试混合样测试新柱-“清洗”色谱柱后再测-考虑样品基质与使用条件对柱稳定性的影响良好的柱使用规范  在使用前过滤溶剂完全润湿在运输中变干的色谱柱了解溶剂对样品的溶解性及分离

7、的影响对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理清除柱填料的局限性  pH  温度  化学兼容性使用新鲜的水溶液，并考虑使用生物稳定剂（如叠氮化钠）定期用强极性的溶剂清洗色谱柱l储存色谱柱时，应冲净缓冲言，并用有机溶剂饱和色谱柱（乙腈）l避免外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或将接头拧的过紧Nowletscoversomegoodcolumnpracticesthatwillhelpyoutoincreaseyourcolumnlifetime.Filtersolventsbeforeyouusethem.The

8、columnistheHPLCsystem’sbestfilter,somakesurethecolumnisn’tperformingthistask.Pretreatsamplesthatcontainstronglyretainedcompoundsofnointerest.Thismeanstoremoveanysamplematrix,orcontaminants,orincompatibleanaly