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时间:2018-07-16
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1、药物对兔离体回肠平滑肌的作用实验目的1.学习离体平滑肌器官的试验方法。2.观察药物对兔离体回肠平滑肌的作用,并初步分析其机制。实验原理多种动物的离体肠管在适宜的环境中,可以较长时间保持其自动节律性运动功能。根据受体在肠平滑肌中的分布的特点,可观察药物的作用,并借助工具分析其作用机制。实验器材和药品1.实验动物家兔,体重2~3kg,雌雄不拘。2.实验器材木锤,小剪刀,小镊子,培养皿,HE-400S恒温平滑肌槽,张力传感器,电脑及记录装置。3.实验药品和试剂台式(Tyrode's)液,0.01%氯化乙酰
2、胆碱,0.1%硫酸阿托品,1%氯化钡。实验步骤和方法1.取家兔1只,以木槌击其枕骨部处死,迅速剖开腹腔,找到回盲部,剪取回肠,置盛有冷台式液的培养皿中,沿肠壁分离并减去肠系膜,将肠管剪成数段,轻轻压出场内容物,用冷台式液冲洗肠管,再换冷台式液,最后将肠管剪成若干2~3cm的小段置于4℃台式液中备用。2.HW-400S恒温平滑肌槽的操作方法①将恒温平滑肌槽右侧面的排液口和排水口均置于关闭状态。②在恒温平滑肌槽内添加足够量的清水,水量达到建议水平线。在预热筒内加入适量营养液。③确保电源已经连接良好。④打
3、开机器电源。⑤此时数码管和加热指示灯快速闪烁,表明系统还没有处于加热状态,当确认水浴槽内加水后,轻按温度设定旋钮,系统进入加热状态。⑥设定实验温度(38±0.5)℃。⑦营养液先在预热筒中预热,然后通过按下自动加液按钮让其自动流到实验药筒。⑧温度达到试验温度后加入实验样本。试验样本通过随机配件中的实验片固定在试验药筒中,用滴管向实验药筒中滴入药液来进行实验。用过的营养液可通过打开设备侧板的放液阀向外排放,排放后请用预热筒中营养液将其冲洗数遍,实验效果更佳。⑨调节气量调节阀。⑩实验时将随机标配的支架杆固
4、定座上,将张力传感器固定在支架杆上,然后将实验样本一端吊在张力传感器上,一端固定在实验钩上,将实验钩牢挂在试验药筒边沿即可开始试验。3.打开电脑,点击桌面中BL-420(BL-410)图标,进入主菜单,再点击生理、药理实验项,选择平滑肌是实验项目进行试验。4.待肠管稳定10min左右,描记一点正常收缩曲线,再依次向实验药筒中滴加药液。待肠平滑肌收缩曲线稳定后,加入一次药液立即标记,并观察、描记收缩曲线。观察指标1.实验药筒中加入1:10万乙酰胆碱0.2ml(2ug),观察并记录其收缩幅度,待收缩达最
5、高点是加入0.1%硫酸阿托品0.1ml。2.换台式液,待肠平滑肌收缩曲线稳定后,再加入与1等量的乙酰胆碱,并与结果相互比较有何不同。3.换台式液,在试验药筒中加入1%氯化钡溶液1ml,结果如何?当作用达到最高点时,加入0.1%硫酸阿托品0.1ml。中药可用枳壳水煎液(1g生药/ml),在加入乙酰胆碱使肠平滑肌收缩张力最大时,加入枳壳水煎液0.2ml,观察枳壳对平滑肌的作用。实验结果以描图和文字记录正常离体肠平滑肌的张力和舒缩情况及加入各种药物后的反应,并对实验结果做适当讨论。注意事项1.肠管两端缝线
6、时,切勿将肠管缝死,只需穿过一层肠壁。2.台式液应保持在(38±0.5)℃。3.报告中将描记或画出肠平滑肌收缩曲线并表示所给药物。思考题1.是离体平滑肌保持其收缩功能需要哪些基本条件?2.用受体学说分析阿托品为什么能对抗乙酰胆碱对肠平滑肌的收缩作用,却不能对抗氯化钡对肠平滑肌的收缩作用?
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