海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶的研究--毕业设计（论文）

《海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶的研究--毕业设计（论文）》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、毕业设计（论文）摘要本次研究采用的是海藻酸钠为载体，利用包埋法固定葡萄糖淀粉酶。研究得出了制备时的给酶量、氯化钙浓度、形成时间对固定化酶的影响，在此基础上，也进一步研究了固定化酶的米氏常数和重复使用稳定性。在单因素实验基础上，通过三因素三水平正交试验得出，氯化钙浓度为2%，形成时间为3.5h，给酶量为22mg是最佳组合，单位质量的酶活力为12151U/g。游离酶的Km为2.50mg/ml，固定化酶的Km为3.63mg/ml。通过固定化之后，酶对底物的亲和力降低了。随着使用次数的增加，酶活性逐渐降低，但是每次反应10

2、min，在使用10次之后，酶活性还有原来的50%。关键词：海藻酸钠；葡萄糖淀粉酶；固定化酶毕业设计（论文）AbstractThisstudyusesthesodiumalginateasthecarrier,theglucamylasewasimmobilizedusingthemethodofembedding.Inthisexperiment,weknowtheinfluenceoftheamountofenzyme,concentrationofcalciumchlorideandcuringtimeonim

3、mobilizedenzyme.Onthisbasis,wemakefurtherstudyonMichaelisconstantandthestabilityofrepeateduseoftheimmobilizedenzyme.Onthebasisofsinglefactorexperiment,wedothethreefactorsandthreelevelsorthogonaltest.Whentheconcentrationofcalciumchlorideis2%,thecuringtimeis3.5h

4、andtheamountofenzymeis22mg,wecangetthebestcombination,unitmassofenzymeactivityis12151u/g.TheKmoffreeenzymeis2.50mg/ml,theKmofimmobilizedenzymeis3.63mg/ml.Aftertheimmobilization,enzymereducestheaffinitytothesubstrate.Withtheincreaseofuse,enzymeactivitydecreases

5、gradually.Immobilizedenzymeretained50%activityafter10reuseswith10minofeachreactiontime.Keywords:calciumalginate;glucamylase;immobilizedenzymeI毕业设计（论文）目录摘要IAbstractII1绪论11.1葡萄糖淀粉酶的简介11.1.1葡萄糖淀粉酶的性质11.1.2葡萄糖淀粉酶与淀粉的反应11.1.3葡萄糖淀粉酶与α-淀粉酶11.2酶固定化的方法11.2.1吸附法11.2.2包埋

6、法21.2.3交联法21.2.4结合法21.3载体材料的介绍21.3.1海藻酸钠的性质21.3.2海藻酸钠与氯化钙的反应21.4总体操作流程31.5研究目的和意义32海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶的方法研究52.1材料52.1.1实验材料和试剂52.1.2仪器与设备52.2测定方法62.2.1斐林试剂的标定62.2.2游离酶活力的测定62.2.3固定化酶活力的测定72.3试验方法72.3.1固定化酶的制备72.3.2海藻酸钙包埋法固定化葡萄糖淀粉酶的研究7I毕业设计（论文）2.3.3正交试验82.4结果与讨论82.4.

7、1固定化酶82.4.2给酶量的确定92.4.3CaCl2浓度的确定102.4.4形成时间的确定112.4.5正交试验122.5小结143海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶特性的研究153.1材料和方法153.1.1实验材料和试剂153.1.2仪器与设备153.2测定方法153.2.1酶活力的测定153.2.2葡萄糖标准曲线的制备153.3试验方法163.3.1葡萄糖淀粉酶米氏常数的测定163.3.2重复使用稳定性的测定183.4小结204结论与展望214.1结论214.2展望21致谢22参考文献23I毕业设计（论文）1绪论

8、1.1葡萄糖淀粉酶的简介1.1.1葡萄糖淀粉酶的性质葡萄糖淀粉酶是由微生物分泌的一种具有外切酶活性的胞外酶，在工业中广泛应用，作用重要，在葡萄糖制造、酿醋、酿酒、有机酸、氨基酸等工业中应用广泛。葡萄糖淀粉酶的底物专一性比较低，可以将淀粉百分之百水解，生成的产物为葡萄糖[1]。葡萄糖糖淀粉酶随作用的温度升高其酶活力逐渐增大，当超过65℃时又随着温度的升高酶活力