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时间:2018-07-16
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1、电解质及药物对离体蛙心活动的影响教学对象:高等医学院校医学专业学生实验课时:4学时实验类型:基础实验课程要求:必修每组人数:4人南华大学医学院机能学实验中心目的与要求掌握Straud离体工作蛙心的灌流方法观察钠、钾、钙三种离子与肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、强心甙、氨茶碱等对离体心脏的作用重点和难点重点Straud离体工作蛙心的制备与灌流方法BL-420生物信息记录系统检测记录心肌收缩张力曲线难点0.65%NaCl对心肌收缩张力曲线影响的机制乙酰胆碱对心肌收缩张力曲线影响的机制课前提问离体工作蛙心如何制备
2、肾上腺素、乙酰胆碱、强心甙、氨茶碱这几种药物中能增强心脏收缩张力的是哪几个?其作用机制是什么实验方法与步骤1、离体蛙心的制备AB2、连接仪器,记录心脏收缩张力曲线实验方法与步骤3、加药,观察心脏收缩张力曲线变化正常0.65%NaCl3%CaCl21%KCl1:10000肾上腺素溶液1:100000的Ach1:10000异丙肾上腺素25:100000的毒K25:10000氨茶碱实验方法与步骤注意事项(1)制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦(2)上述各实验项目,一旦出现变化就应立即用新鲜任氏液换洗,以免心肌受损,必须待心功能恢复正常
3、后方能进行下一步实验(3)蛙心插管液面应保持恒定,以免影响结果(4)滴加药品和换取新鲜任氏液须及时标记,以便观察分析吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内废液的滴管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果(6)药物作用不明显时,可适量增加,密切观察药物剂量添加后的实验结果分析讨论1、0.65%NaCl0.65%NaCl灌流细胞外液Ca2+↓↓心肌细胞动作电位期间Ca2+内流↓↓心肌细胞胞浆Ca2+↓↓心肌收缩力收缩↓↓细胞外液Ca2+浓度升高慢反应细胞4期自动除极化速度增加自律性增加工作细胞动作电位期间Ca2+内流增加肌浆Ca2+浓
4、度增加兴奋收缩耦联增强心肌收缩力增强心率增快2、3%CaCl2分析讨论细胞外液K+浓度升高K+抑制Ca2+内流心肌收缩力下降膜内外K+浓度梯度下降静息电位绝对值减小静息电位与阈电位水平的电位差减小心肌细胞兴奋性增高Ca2+内流减少兴奋收缩耦联削弱3、1%KCl分析讨论心肌细胞膜β1受体结合Ca2+与肌钙蛋白亲和力增加,肌浆网摄钙速度增加心肌舒张延长细胞膜对Ca2+通透性增加4期自动除极化速度增加自律性增加,心率加快复极期肌浆Ca2+浓度降低速度增加肾上腺素肌浆网对Ca2+通透性增加动作电位期间Ca2+内流性增加心肌收缩力增
5、强4、肾上腺素分析讨论心肌细胞膜M受体结合细胞膜对K+通透性增加自律性降低,心率减慢细胞膜对Ca2+通透性下降动作电位期间Ca2+内流减少心肌收缩力降低窦房结细胞最大复极电位绝对值增大4期K+外流增加Ach抑制钙通道5、Ach分析讨论6、异丙肾上腺素:激动β1受体,机制同肾上腺素,心率加快,收缩增强7、低钙任氏液:细胞外液钙离子减少,兴奋收缩耦联削弱,心率减慢,收缩减弱,模拟心衰8、毒K:强心苷类药物,可选择性作用于心肌细胞,可竞争性抑制心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶,使心肌细胞内Ca2+含量增加,产生正性肌力作用,
6、使心肌收缩力增强分析讨论9、氨茶碱磷酸二酯酶抑制剂,磷酸二酯酶是cAMP降解酶,抑制此酶可增加细胞内cAMP含量,发挥正性肌力作用分析讨论结论1、0.65%NaCl,1:100000Ach,低钙任氏液可使蛙心频率减慢,心跳幅度减小;2、3%CaCl2,1:10000肾上腺素,1:10000异丙肾上腺素,25:10000氨茶碱可使蛙心频率增快,心跳幅度增大;3、25:100000毒K可使蛙心频率减慢,心跳幅度增大;4、1%KCl可使蛙心频率增快,心跳幅度减小思考题如任氏液中钾离子浓度明显增高,蛙心会处于什么状态?当显著高钾时
7、,细胞膜内外钾浓度梯度减小,使得静息电位绝对值减小至-55mv,使得钠通道失活,从而使心肌细胞兴奋性丧失,心脏可停搏在舒张状态
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