泵抑制剂对环丙沙星在铜绿假单胞菌内聚积影响

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时间:2018-07-15

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1、泵抑制剂对环丙沙星在铜绿假单胞菌内聚积影响【摘要】目的探讨耐药铜绿假单胞菌(PA)中是否存在主动外排系统,以揭示PA对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法检测碳酰氰间氯苯腙(CCCP)对16株PA药物MIC的影响;荧光法检测PA耐药菌和敏感菌对环丙沙星(CIP)的摄取,以及加入CCCP后对CIP累积量的变化情况。结果外排泵阳性株为4株,CCCP可以使PA16菌体内环丙沙星的累积量显著上升,而其它菌株中加入CCCP后,环丙沙星的累积量变化不大。结论本地区PA中可能存在氟喹诺酮药物的主动外排系统。�【关键词】铜绿假单胞菌;氟喹诺酮药

2、物;主动外排系统��EffectsofpumpinhibitoronaccumulationofciprofloxacininpseudomonasaeruginosaclinicalisolatesZHAOTing-kun,MAOShu-mei,SHILi-hong,etal.DepartmentofPharmacology,AppliedPharmacologicalLaboratory,WeifangMedicalUniversity,Weifang261042,ShandongProvince,China�【Abs

3、tract】ObjectiveToexplorewhetheractiveeffluxsystemispresentinP.aeruginosainorder7toidentifytheresistancemechanismofP.aeruginosatoFluoroquinolonesantibiotics.MethodsTheinfluenceofcarbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone(CCCP)onMICsofantibioticstoP.aeruginosaclinicali

4、solatesweretestedbyagardilutionaccordingtoNCCLS.TheaccumulationofciprofloxacininP.aeruginosaweremeasuredbyafluorescencemethodandtheinfluenceofCCCPwasanalyzed.Results4P.aeruginosaisolateshadtheeffluxpumpsforβ-lactamantibioticsorfluoroquinolones.CCCPcoulddramaticall

5、yincreasetheaccumulationofciprofloxacininP.aeruginosaPA16.However,CCCPhadlittleeffectontheaccumulationofciprofloxacininotherP.aeruginosaclinicalisolates.ConclusionTheremayhaveanactiveeffluxsystemtargetingfluoroquinolonesinP.aeruginosa.�【Keywords】P.aeruginosa;Fluor

6、oquinolones;Activeeffluxsystem铜绿假单胞菌(pseudomonas7aeruginosa,PA)是医院常见条件致病菌之一,临床分离株多重耐药直接影响感染的治疗,因而研究耐药机制指导合理用药是大家关注的热点[1]。本试验对临床分离的PA进行环丙沙星(CIP)的摄取分析,探讨PA的多重耐药和主动外排泵的关系及泵抑制剂的作用,为临床抗感染治疗提供初步的理论依据,现报告如下。�1材料与方法�1.1菌株由附属医院自PA临床分离株中筛选出对CIP的耐药菌8株和敏感菌8株。质控标准菌株ATCC27853由四

7、川抗生素工业研究所提供。�1.2主要试剂CIP中国药品生物制品检定所;头孢噻肟(CTX),头孢他啶(CAZ),哈尔滨誉衡药业有限公司;碳酰氰基-间-氯苯腙(CCCP)Sigma公司。�1.3主要仪器SakumaMIT-P细菌多点接种仪(日本);TU-1901紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Eppendorf5810R型冷冻离心机(德国);R540型荧光分光光度计(日本岛津公司)。�1.4泵抑制剂CCCP对抗菌药物MIC的影响制备CCCP浓度为3μg/ml的抗生素琼脂平皿和仅含3μg/mlCCCP的琼脂平

8、皿。操作参照琼脂稀释法测定MIC[2]。结果判断[3]:将应用CCCP后MIC值降至原值1/4或以下的菌株判为外排泵阳性。�1.5PA对CIP摄取分析� 71.5.1标准曲线用0.1mol/L盐酸-甘氨酸缓冲液(pH3.0)配制6.25、12.5、25、50、100、200ng/ml不同浓度的药物溶液,

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