张荣荣论文初稿-tdy-20170509

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1、1.本科毕业论文基于流式细胞仪的水中细菌总数和藻类的快速测定与研究RapidDetectionandResearchofBacteriaandAlgaeinWaterbyFlowCytometryAssay学院名称：化学与环境工程学院后面延长线，很难看专业班级：环境工程13-1学生姓名：张荣荣学号：13052110163指导教师姓名：田大勇指导教师职称：副教授2017年5月毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织

2、已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得安阳工学院及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作者签名：　　　　　日　期：　　　　指导教师签名：　　　　　日　　期：　　　　　使用授权说明本人完全了解安阳工学院关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签

3、名：　　　　　日　期：　　　I目录摘要IAbstractII第1章绪论1第2章流式细胞仪的原理及应用现状12.1流式细胞仪工作原理12.1.1液流系统22.1.2光路系统22.1.3检测分析系统32.2流式细胞仪操作步骤32.3流式细胞术在国内外应用的现状4第3章细菌的计数63.1平板菌落计数法63.1.1实验仪器和材料63.1.2实验步骤63.2流式细胞仪计数法73.3细菌测定结果7第4章藻细胞的计数94.1显微镜计数法94.2流式计数法104.3结果与讨论104.4藻细胞的梯度测试124.5实时监测藻类和水中细菌的数目变化15第5章藻的死活状态分析165.1藻细胞死活状态

4、检测165.2实验结果与分析17第6章藻的毒性测试材料与方法186.1材料186.2实验方法206.3羊角月牙藻的毒性测试216.4藻的死活状态、凋亡状态分析以及DNA含量测定24第7章藻的毒性机理研究267.1四溴的毒性效应277.24溴的毒性效应287.3十溴的毒性效应297.4PFOS的毒性效应307.5Fe(NO3)3的毒性效应307.6Pb(NO3)2的毒性效应317.7Cd(NO3)3的毒性效应32第8章结论与展望338.1结论338.2展望33致谢34参考文献35附录38基于流式细胞仪的水中细菌总数和藻类的快速测定与研究摘要：本文的研究对象是水中细菌和藻类，使用

5、的仪器主要是流式细胞仪，运用流式细胞仪对细菌总数和藻类进行测定，并尝试着尽可能多的利用流式细胞仪对研究对象进行深入的多方面的探讨。本文主要研究内容有以下几个方面：(1)分别采用平板计数法和流式计数法对水中细菌进行计数，观察比较得出结论：流式细胞仪计数和传统的平板计数法之间存在着较好的线性关系，（R2>0.900），因此，可以直接用流式细胞仪对细菌进行测定。(2)分别对藻类（本实验使用的藻类全部为羊角月牙藻）采用显微镜直接观察计数和流式细胞仪计数，将结果进行分析观察比较，可得出结论：藻的流式细胞仪计数及显微计数之间存在着很好的线性关系（R2>0.950），可以直接用流式细胞仪对

6、藻类进行测定，且对藻类的计数比细菌的更加精确。(3)除了直接计数之外，本研究还对藻细胞的死活状态进行鉴定，采用的是SYBRGreenⅠ和碘化丙啶双染色的方法，通过将藻细胞煮沸杀死，按照死亡比例分别为0%、25%、50%、75%、100%进行检测，观察相应的密度图可以明显的区分出死活细胞的大致分布和既定的比例之间有非常好的关系。(4)探究重金属及有机污染物对藻类的毒性机制，分析致毒过程是否和细胞膜的损伤、细胞凋亡以及细胞周期有所关联，实验表明：毒性越强，藻的细胞膜损伤越严重，细胞死活之比越高；细胞的凋亡状态与毒性物质的关系不太明显；细胞周期中G1期的变化波动性较大，但是总体呈现

7、一个下降的趋势，S期的变化大致是先增加后趋于平缓，G2期走势也是不断降低的。关键词：流式细胞术细菌藻类快速检测死活鉴定细胞周期IIIRapidDetectionandResearchofBacteriaandAlgaeinWaterbyFlowCytometryAssayAbstract:Atpresent,thedeterminationofthetotalnumberofbacteriainwaterisusuallyflatplatecountingmethod,butthemethodiscom