板蓝根汤剂纳米颗粒的分离与表征

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1、板蓝根汤剂纳米颗粒的分离与表征中文摘要板蓝根是十字花科植物菘蓝的干燥根，具有清热解毒，凉血利咽的功效。在治疗流行性病毒时有较强的抗菌、抗病、解毒的作用，是用于治疗病毒感染时的常用临床中草药。但目前其抗菌抗病毒的作用物质基础还不明确，同时由于其以汤剂的用药方式增加了其研究的复杂性。其复杂性在于板蓝根药材化学成分多，汤剂的给药方式往往是多种有效物质相互协同或拮抗，同时，汤剂的胶体学性质也在一定程度上影响着其药效的发挥。本课题围绕着前期科学假说“中药有效成分群是通过自组装成特殊的纳米构造来实现药物在体内的递送、释放和发挥药效”开

2、展，运用胶体化学和生物化学的研究方法，对板蓝根汤剂中纳米颗粒的存在形态及其基本性质等方面进行研究。板蓝根汤剂经过离心除杂后发现其具有明显的丁达尔现象，这说明板蓝根汤剂存在着胶体体系；通过AFM、SEM等手段观察板蓝根汤剂胶体颗粒的形态特征，发现板蓝根汤剂胶体颗粒呈大小不等的球形和椭球形，并且颗粒不稳定会相互聚集成小丘状或粘连成串；通过超滤的方法去除掉板蓝根汤剂中的胶体颗粒后发现其抗病毒活性大大降低。利用凝胶色谱对板蓝根汤剂中的纳米颗粒进行分离纯化。板蓝根汤剂5000g离心10min后上样，色谱条件为：Sephacryl™S

3、-1000柱(1.0cm×100cm)，缓冲液为0.02molL-1磷酸盐缓冲液(pH5.0)，流速为0.35mLmin-1，上样量为2mL，检测器为马尔文动态光散射仪。对Sephacryl™S-1000凝胶色谱柱分离得到的纳米颗粒进行表征。纳米颗粒大小主要分布在10~100nm之间，Zeta电位为-9.0±1.0mV的范围内；对其稳定性进行研究表明：pH、温度对其稳定性有一定的程度的影响，时间对其稳定性影响很小；对其进行组成成分的分析，其中干物质、总糖、总氨基酸分别占总上样量的48%、97.6%、1%，其颗粒中总糖以多糖

4、的形式存在；另外，表告依春、靛蓝、靛玉红在纳米颗粒中的含量较少。对分离得到的板蓝根汤剂纳米颗粒进行MDCK细胞抗流感病毒活性实验，发现其具有一定的抗病毒活性，修复率达到39%。同时，颗粒与抗病毒药物利巴韦林结合后作用于受流感病毒侵染的MDCK细胞，能明显增强抗病毒活性。关键字：板蓝根汤剂，纳米颗粒，粒径，Zeta电位，抗病毒63IsolationandCharacterizationofNanoparticlesfromRadixIsatidisDecoctionAbstractRadixisatidis,thedried

5、rootofisatiswhichisakindofcruciferousplant,isprovedtobeeffectiveinclearingheat,detoxification,coolingbloodandrelievingsorethroat.Withstrongeffectsinantibacterial,disease-resistantanddetoxificationinthetreatmentofpandemicvirus,Radixisatidisisgenerallyconsideredtobe

6、acommonclinicalherbalmedicinewhentreatingviralinfections,however,itsantibacterialandantiviralmaterialbasisisnotclear.Besides,thetraditionaldecoctionwhenusingradixisatidisincreasesthecomplexityinresearch,thatis,theactiveingredientsofradixisatidisincludemultiplechem

7、icalcompositionandtheeffectofmedicalbrothistheresultsofmutualsynergisticorantagonisticeffectsoftheseactiveingredients.Moreover,thecolloidalnatureofthedecoctionalsohasanimpactuponefficacyofplay.Inthisissue,wearetryingtoutilizechemicallycolloidalandbiochemicalmethod

8、stoinvestigatethepresenceandbasicpropertiesofthenanoparticleforminradixdecoctiononthebasisofformerhypothesis,whichis“theactiveingredientgroupofTCM(Tradi