c型产气荚膜梭菌α-β2-β1融合蛋白的免疫原性研究

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1、C型产气荚膜梭菌α-β2-β1融合蛋白的免疫原性研究作者：韩学波,于欣,廖国玲,谢琴,曾瑾单位：1.宁夏医学院医学检验系，银川750004；2.宁夏大学生命科学学院，银川750021【摘要】目的研究含α-β2-β1融合基因的重组菌株BL21(DE3)(pXETAB2B1)的免疫原性。方法用重组菌株BL21(DE3)(pXETAB2B1)制备包涵体和全细胞培养物两种抗原，采用氢氧化铝胶体作为免疫佐剂，免疫ICR小白鼠，用C型产气荚膜梭菌外毒素粗提物进行攻毒，观察小鼠的保护情况。结果包涵体加氢氧化铝

2、凝胶制备的抗原保护效果对于1LD100和2LD100的攻毒均达到100%；全细胞培养物加氢氧化铝凝胶制备的抗原保护效果对于1LD100和2LD100的攻毒达到50%和20%。结论已获得具有一定免疫原性重组菌株，可作为预防C型产气荚膜梭菌所致疾病的候选菌株。【关键词】C型产气荚膜梭菌融合蛋白免疫保护　　StudyonImmunogenicityofα-β2-β1FusionProteinofClostridiumPerfringensTypeC　　(1.Dept.ofExamnation，Ning

3、xiaMed.Coll.，Yinchuan750004；2.CollegeofLifeScienceNingxiaUnivertsity，Yinchuan750021)　　Abstract：ObjectiveToexploretheimmunogenicityofalphatoxin、beta2toxinandbeta1toxinfusiongeneintherecombinantstrainBL21(DE3)(pXETAB2BZ)ofClostridiumperfringenstypeC.MethodsInclusionbo

4、dyandthestraincultureofrecombinantstrainBL21(DE3)(pXETAB2BZ)weremadeandthealuminumhydroxidehydrateandFreund'sadjuvantwereaddedasadjuvantrespectively.ICRmousewasimmunizedwithdifferentantigensandchallengedwithexotoxinofClostridiumperfringenstypeC.Immunogenicityofthere

5、combinantstrainwereobservedinmice.ResultsImmunizationwithinclusionbodycontainingaluminumhydroxidegelcouldprotectICRmousefromthechallengeof1LD100and2LD100.Theprotectiverateofthestrainculturecontainingaluminumhydroxidegelwas70%and20%fromthechallengeof1LD100and2LD100re

6、spectively；TheinclusionbodyandthestrainculturecontainingFreund'sadjuvantwas50%and10%fromthechallengeof2LD100ofClostridiumperfingensCtypetoxin.ConclusionTherecombinantstrainBL21(DE3)(pXETAB2BZ)hadimmunogenicityandcouldbeusedascandidatestrainofvaccination.　　Keywords：c

7、lostridiumperfringenstypeC；protectiveantigen；immunogenicityt　　C型产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)，又称魏氏梭菌(C1welchii)是一类重要的人兽共患病的病原体，是引起动物出血性、坏死性肠炎和肠毒血症的主要病原菌，易导致新生幼畜和幼禽(尤其新生仔猪)高致病性和高病死率。长期以来一直认为C型产气荚膜梭菌只产生主要的毒力因子α和β毒素(现称β1毒素)，并做了许多研究［1-5］。近年来又发现另一种毒力因子即&

8、beta;2毒素［6］。免疫佐剂是与抗原混合注射于动物体内，能非特异性的改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答的一种物质。本实验将含α-β2-β1融合基因的重组菌株BL21(DE3)(pXETAB2B1)优化［7］后，进一步制备抗原，并配以氢氧化