产气荚膜梭菌检验.pdf

《产气荚膜梭菌检验.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、GB4789.13－2012食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验内容提要★产气荚膜梭菌与人类健康★方法修订★检验方法第一部分：产气荚膜梭菌与人类健康一、流行病学产气荚膜梭菌是人类气性坏疽的主要病原菌。1892年，美国病理学家W.H.韦尔奇等自尸体分出本菌，故又称魏氏梭菌。本菌广泛存在于土壤、人和动物的肠道以及动物和人类的粪便中，会散发臭味。常因深部创伤而感染。有些菌株产生肠毒素，可引起食物中毒。一、流行病学产气荚膜梭菌为厌氧芽胞杆菌，是引起食源性胃肠炎最常见的病原之一。可引起典型的食物中毒爆发。临床特征是

2、患者剧烈腹绞痛和腹泻。摄食被本菌污染的食品后8～22h开始发病。一、流行病学在食品中该菌数量必须达到很高时（1.0×10７或更多），才能在肠道中生产毒素，病程通常在24小时内，但某些个体的不显著症状可能会持续1～2周，已报导有少数病人因脱水和其它混合感染而导致死亡。一、流行病学据报道魏氏梭菌食物中毒在美国占细菌性食物中毒的30%左右。美国疾病控制中心最新统计数据表明，每年美国由产气荚膜梭菌引起的食物中毒人数在250,000左右，其中大约只报告1200例，暴发约20起，其中约有十人死亡，每年造成的经济损失在1.2亿美元

3、左右。一、流行病学大量的暴发和少量的发病都与公共饮食有关。例如：学校的自助食堂和护理病房，产气荚膜梭菌中毒最常发生于儿童和老人。一、流行病学产气荚膜梭菌广泛分布于环境中，经常在人和许多家养及野生动物的肠道中发现。该菌的芽胞长期存在于土壤和沉淀物中，从牛肉、猪肉、羔羊、鸡、火鸡、焖肉、红烧蔬菜，炖肉和肉汁中，可以分离产气荚膜梭菌。一、流行病学引起食物中毒的食品大多是畜禽肉类和鱼类食物，牛奶也可因污染而引起中毒，原因是因为食品加热不彻底，芽胞在食品中大量繁殖所致。一、流行病学此外，不少熟食品，由于加温不够或后污染而在缓慢

4、的冷却过程中，细菌大量繁殖并产生肠毒素，其食品并不一定在色味上发现明显的变化，人们在误食了这样的熟肉或汤菜，就有可能发病。一、流行病学产气荚膜梭菌有时很不容易形成芽胞。芽胞的热抵抗力很强，由患者粪便中分离的芽胞能耐受100℃1～5小时的加热。产气荚膜梭菌－－临床意义•致病物质：荚膜、多种毒素和侵袭性酶•所致疾病：气性坏疽食物中毒坏死性肠炎细致病所致致病机理菌物质疾病外毒发酵肌肉组织糖类→气体→气气性素肿坏疽产胞外血管通透性↑→水分渗出→水气酶肿，组织坏死；水气夹杂→捻发荚荚膜感；膜毒素入血→毒血症，休克食物梭肠

5、毒肠毒素→嵌入肠细胞膜，破坏膜离中毒菌素子功能，改变膜的通透性→腹泻一、流行病学研究发现，产气荚膜梭菌至少可以产生15种以上的毒素，但目前仅有5～6种毒素，即α、β、ε、ι毒素及肠毒素（CPE）、β2毒素等被认为是主要致病性毒素。其中CPE和β2毒素是人食物中毒及胃肠疾病的重要致病因子。一、流行病学根据产气荚膜梭菌产生四种致死性外毒素（α、β、ε、ι毒素）的能力，将其分为五种类型，即A、B、C、D、E型。5型中对人致病的主要是A型和C型，A型最常见，引起气性坏疽和食物中毒；C型能引起坏死性肠炎。一、流行病学当产品达到

6、合适温度时，那些未被杀死的芽胞，由于蒸煮而使其可能萌发。所以，蒸煮后需要快速冷却。适当的热处理（60℃以上）、充分再加热，冷却食品（最低中心温度为24℃），也是必要的控制措施，培训食品加工人员，仍是控制措施的一个关键方面。产气荚膜梭菌的卫生学意义•对消毒过程和其它不良环境条件有强抵抗力，作为粪便陈旧污染的指标•比原虫的包囊（卵囊）小，可用作过滤效果评价的指标•产气荚膜梭菌芽胞的生存时间过长，远远超过了包括病毒和原虫在内的肠道致病微生物的生存时间。二、生物学特性1、形态：革兰氏阳性直杆状，菌体两端钝圆，1～2×2～10

7、m，卵圆形芽胞位于菌体中央或近端，不比菌体明显膨大，一般培养条件下很难形成芽胞（无糖容易），无鞭毛，有时可能形成荚膜。二、生物学特性2、培养：本菌生长和繁殖速度极快，在适宜条件下增代时间仅8min，在普通琼脂平板上培养15h左右可见到菌落，培养24h菌落直径2～4mm，呈凸面状，表面光滑半透明，正圆形，在营养成分不足或琼脂浓度高的平板上，有时尤其经过传种的菌株，可能形成锯齿状边缘或带放射状条纹的R型菌落。二、生物学特性2、培养：在含人血、兔血或绵羊血的琼脂平板上培养的菌落周围有双层溶血环，内环溶血完全，外环溶血不完

8、全。二、生物学特性2、培养：在庖肉培养基中培养数小时即可见到生长，产生大量气体，肉渣或肉块变为略带粉色，但不被消化。二、生物学特性3、生化特性：所有菌株均发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖及蔗糖，产酸产气，液化明胶，不产生靛基质，还原硝酸盐为亚硝酸盐，但也有例外。二、生物学特性3、生化特性：发酵牛奶中的乳糖、牛奶酸凝固，同时由于大量产气凝块碎裂，所谓暴烈