液相色谱-质谱联用技术的发展与应用

液相色谱-质谱联用技术的发展与应用

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时间:2018-07-14

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1、液相色谱-质谱联用技术的发展与应用摘要:本文主要介绍了液相色谱-质谱联用技术在药物分析、食品安全检测以及临床疾病诊断等方面的研究进展。关键词:液相色谱—质谱联用;分析液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)是以质谱仪为检测手段,集HPLC高分离能力与MS高灵敏度和高选择性于一体的强有力分离分析方法[1]。特别是近年来,随着电喷雾、大气压化学电离等软电离技术的成熟,使得其定性定量分析结果更加可靠,同时,由于液相色谱-质谱联用技术对高沸点、难挥发和热不稳定化合物的分离和鉴定具有独特的优势,因此,它已成为中药制剂分析、药代动力学、食品安全检测和临床医药学研究等不可缺少的手段。1液相色谱-

2、质谱联用技术的发展1977年,LC-MS开始投放市场;1978年,LC-MS首次用于生物样品中的药物分析;1989年,LC-MS-MS取得成功;1991年,APILC-Ms用于药物开发;1997年,LC-MS用于药物动力学筛选;1999年,APIQ-TOFLC-MS-MS投放市场,大气压离子化接口的应用,彻底改变了面貌,使其迅速成为制药工业中应用最广的分析仪器[2]。2液相色谱-质谱联用技术的应用2.1在食品安全检测中的应用随着人们的生活水平日益提高,对食品的营养性、保健性和安全性的关注均趋于理性化、科学化。国家对食品的监管也愈加重视起来,因此食品监督部门在食品检测中应用了一种

3、准确的分析手段—高效液相色谱法(HPLC)。近几年发展起来的高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS),集液相色谱对复杂基体化合物的高分离能力和质谱独特的选择性、灵敏度、相对分子质量及结构信息于一体而广泛应用于食品检测方面,为食品工业中原材料筛选、生产过程中质量控制、成品质量检测等提供了有效的分析检测手段[3]。目前,LC-MS主要检测食品中农兽药的残留、食品中违禁物质和有害添加剂的检测、保健品中功效成分的检测等。该技术在食品分析检验方面具有十分广阔的前景。2.1.1食品中农兽药残留的检测食品及农产品的残留分析对灵敏度、重现性与选择性的要求非常高,常常需要在复杂的基质中检测p

4、pb级甚至更低浓度水平的痕量残留物质。要达到以上要求,除了良好的样品前处理之外,还需要选择高性能、高灵敏度的LC-MS系统进行检测分析。李波、邓晓军等[4]建立了用LC-MS测定植物、动物肉类、水产品等产品中草甘膦(PMG)及其代谢物氨甲基磷酸(AMPA)残留量的方法。采用SupelcoDiscoveryC18柱(150mm×2.1mm,5μm)流动相A:0.1%甲醇-乙腈;B:5mmolL-1醋酸铵-0.1%甲酸采用多反应监测技术所确定的定性离子对其进行定性,同位素内标法定量。此方法的回收率和精密度符合残留检测要求。2.1.2食品中违禁物质和有害添加剂的检测食品中添加剂的含量

5、过高会对人体产生不同程度的危害,甚至威胁人的生命安全,所以有必要建立一套能够快速鉴定并且准确定量食品中有害添加剂和违禁药物的方法。对它们的测定有分光光度法、毛细管电泳法以及气相色谱法等,但LC-MS由于具有只需对样品进行简单预处理,适用于含量少、不宜分离得到或在分离过程中容易发生变化或损失的成分的特点,在对食品中违禁物质和有害添加剂的分析研究中得到了广泛的应用[5]。黄芳,黄晓兰等[6]建立了食品中三聚氰胺的高效液相色谱-质谱测定方法,用KromasilC18柱,采用正离子模式的电喷雾质谱检测,线性范围为0.01-0.5mg/L,检出限为0.01mg/L,回收率为80%-99%

6、。2.1.3保健品中功效成分的检测我国保健食品功效成分的测定方法主要有HPLC、TLC、GC、比色法等,但利用这些方法测定的结果都不能确切代表功效成分,远远不能满足检测工作的需要[7],但LC-MS联用技术在对保健食品功效成分进行分析时,可以同时得到化合物的保留时间、在线紫外光谱、分子量及特征结构碎片等丰富的信息,具有高效快速、准确、灵敏度高的特点,适合保健食品中功效成分的分析。2.2在药物分析中的应用LC-MS由于具有其他分析方法无法比拟的分析手段,广泛应用于药物分析中,本文主要介绍其在已知化合物定性分析及结构鉴定、未知成分定性分析以及药物代谢中的应用。2.2.1已知化合物定

7、性分析及结构鉴定中的应用张萍等[8]采用HPLC法测定18份细辛属药材、7分马兜铃属药材中马兜铃酸A的含量,流动相为甲醇-水-醋酸(60:36:4),流速1.0mL/min,柱温20。C,检测波长316nm;同时采用LC-MS法对细辛中马兜铃酸A进行结构确认。结果马兜铃酸A的平均回收率为97.5%,RSD为1.8;色谱图中保留时间为9.036min的色谱峰,以及从质谱图得到m/z为339的[M-H]-峰,确认为马兜铃酸A。2.2.2未知成分定性分析中的应用现代药理学研究表明,柴胡中柴胡皂苷类

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