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1、第2卷 第8期环境工程学报Vol.2,No.82008年8月ChineseJournalofEnvironmentalEngineeringAug.2008絮凝菌的细胞融合研究常玉广1,2 马 放2 夏四清1 王学江1 陈 玲1 赵建夫1(1.同济大学环境科学与工程学院,污染控制与资源化研究国家重点实验室,上海200092;2.哈尔滨工业大学市政环境工程学院,哈尔滨150090)摘 要 从活性污泥中分离到具有絮凝特性的絮凝菌株F2和F6,絮凝率在80%以上。为了提高絮凝菌的絮凝效果,利用F2和F6作为亲本菌株,进行原生质体融合。首先对菌株F2和
2、F6进行药物抗性遗传标记选择,然后分别对融合条件进行优化,并对融合子进行絮凝测定。实验结果确定了F2具有氨苄青霉素抗性,F6具有新霉素抗性,青霉素敏感试验中,最适浓度分别为F2为0·6U/mL、F6为0·1U/mL,得到了相应的原生质体及融合子;经絮凝试验验证,数株融合子表现出产絮特性,但絮凝效果与亲本菌株F2和F6相当。关键词 絮凝菌 原生质体 融合子中图分类号 TU991 文献标识码 A 文章编号 1673-9108(2008)08-1138-05Cell-fusionofflocculationproducingbacteriaCha
3、ngYuguang1,2 MaFang2 XiaSiqing1 WangXuejiang1 ChenLing1 ZhaoJianfu1(1·StateKeyLaboratoryofPollutionControlandResourcesReuse,CollegeofEnvironmentalScienceandEngineering,TongjiUniversity,Shanghai200092;2·SchoolofMunicipalandEnvironmentalEngineering,HarbinInstituteofTechnology,
4、Harbin150090)Abstract StrainsofF2andF6havingflocculationcharacteristicswerescreenedfromtheactivatedsludge.Theefficiencyoftheflocculationwasmorethan80%.Inordertoimprovetheirflocculationeffec,tF2andF6wereusedasparentstrains,andprotoplast-fusiontechniquewasadopted.Firstly,thedr
5、ugresistancegeneticmarkerofstrainsF2andF6wasselected.Thentheconditionsofprotoplast-fusionwereoptimizedrespectively,andtheflocculatingactivitiesoffusantwereinvestigated.TheresultsoftheexperimentsshowedthatF2hadam-picillinresistanceandF6hadneomycinresistance.Amongthetestofpeni
6、cillinsensitive,protoplastandfusantarecorrespondinglyobtainedwhenthebestconcentrationofpenicillinforstrainF2is0·6U/mLandforstrainF6is0·1U/mLrespectively.Throughtheverificationofflocculateontes,tmanyfusantshadflocculant-producingcharacteristicsandtheirflocculationcapacitiesar
7、esimilartoparentstrainsF2andF6.Keywords flocculationbacteria;protoplas;tfusant基金项目:国家重点基础研究计划(973)项目(2004CB418505);中国博士后科学基金资助项目(20070420671)收稿日期:2007-10-29;修订日期:2008-03-18作者简介:常玉广(1973~),女,博士后,主要研究方向:环境生物技术与污水处理。E-mai:lchangyuguang@yahoo.com.cn 原生质体融合技术作为高频重组的有效方法和遗传学研究工具,
8、打破了不同物种间(属间、甚至门间)进行基因重组的天然障碍。由于其基因重组频率较高,并有可能导致异源DNA间的重组,因此,为遗传分析提供了一个有利手段[
