心肌酶的检测方法

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1、心肌酶谱的检测方法1检验目的规范检测“肌酸激酶（CK）”的过程。2适用范围适用于正常人和病人血清“肌酸激酶（CK）”的测定。3职责3.1责任人：生化室当班工作人员。3.2质量要求：按照《临床化检验室内质量控制作业指导书》进行室内质控，合格后可发报告。3.3完成时间：门诊检验结果当天下午2:30发报告；病房检验结果当天下午4:00发报告。4检验原理：酶偶联法CK磷酸肌酸＋ADP－→葡萄糖－6－磷酸＋ADPG6PDH葡萄糖－6－磷酸＋NADP－→6－磷酸－葡萄糖酸＋NADPH＋H＋，NADPH的生成。引起在340nm吸光度上升，上升的速率与CK的活力成正比，可以用（340

2、nm和405nm）速率法测量。5样本要求：5.1样本类型样本量:空腹取静脉血3ml(血清或肝素抗凝血浆),按顺序将申请单和样本一一对应编号。认真检查检验材料、检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液量等。5.2容器和抗凝剂种类:黄色胶头试管，含促凝剂；红色胶头普通生化管；肝素钠、肝素锂抗凝试管。5.3样本处理方法将已编号的样本放入37℃的水温箱中，待血液自动凝固后，取出配平离心，3000r/min×5min。将血清分离放入DADEBEHRINGRXL专用样本杯后，仔细观察是否符合要求，否则申请重新采集样本;上雅培AEROSET全自动生化分析仪直接将试管放入样本架上

3、。5.4样本的稳定性:血清、血浆肌酸激酶（CK在20-25℃放置可保存1天，2-8℃贮存最多7天；冷冻保存可超过1个月。已检测标本2—8℃保存3天。6仪器：杜邦RXL全自动生化分析仪雅培AEROSET全自动生化分析仪7试剂:7.1杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂；雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂。7.2杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂准备:将肌酸激酶（CK）试剂船按仪器操作说明书加入仪器试剂仓内。避光，2-8℃保存24hr，15-25℃保存5hr。7.3雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂准备:按仪器作业指导书准备试剂,未开封试剂在贮存于15－30

4、℃下时，稳定性可保持到有效期截止时为止,开封后试剂上机的稳定期为42天。8校准8.1来源：杜邦RXL、雅培AEROSET配套校准液。8.2贮存条件：原校准物在0～4℃以下可保存至有效期8.3准备：直接用注射器抽取原液0.3ml备用。8.4校准条件：A：质控失控；B：定期校准；C：试剂更换批号。8.5校准后的稳定期可保持约41天（984小时），每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求，使用至少1个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。9程序步骤9.1样本编号→样本分离→检验仪器准备、试剂准备→室内质控测定、样

5、本测定、资料录入→分析室内质控、分析测定结果→打印报告单→结果审核签发9.2上机操作：见仪器作业指导书.10质量控制10.1来源：朗道质控物。10.21个数：1个水平10.3贮存条件：质控物存放于2-8℃可保存至有效期，溶解后25℃可保存12小时，4℃可保存5天，分装存放于-20℃，可稳定一个月。10.4准备：每瓶加3.00ml相配稀释液充分溶解后分装。溶解质控血清时间为30分钟,分装存放于-20℃。10.5程序：10.5.1每隔24小时运行至少1个质控水平（正常值）。10.5.2如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。1

6、0.5.3如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。10.5.4每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标准。10.5.5操作:详见质量控制作业指导书10.6分析参数10.6.1杜邦RXL全自动生化分析仪分析参数样本量(μl)：14试剂量(μl)：R1：95R2:255稀释液量：方法：RATE　　　预设系数：C0：－8.85　C1：8.044主波长（nm）：340次波长（nm）：405温度(℃)：37反应时间（min）：3反应方向：正反应（+）线性范围：0－800U/L10.6.2雅培AEROSET全自动生化分析仪分析参数Reactionmode:rate

7、upReadtime24-33Blankreadtime:14-16Flex:22-25样本量(μl)：8试剂量(μl)：R1：160R2:40主波长（nm）：340次波长（nm）：412温度(℃)：37Calibrationmodefactor4127线性范围：0－800U/L11结果计算以复合校准品校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12生物参考区间：24～170U/L13可报告区间:20-1600U/L14危急值：暂无规定15性能参数15.1本法线性范围为20-1600U/L，不准确度允许范围±3