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时间:2018-07-13
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1、◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外使用说明◆AcrylCarrier核酸助沉剂◆目录号1117◆使用手册◆实验室使用,仅用于体外-1-AcrylCarrier核酸助沉剂目录号:1117目录编号包装单位1117011ml1117025mlv产品介绍:乙醇低温沉淀是回收液体样
2、品中的DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀并不能完全回收样品中的核酸,至少丢失30%左右的核酸。如果液体样品中的核酸浓度很低或DNA<200bp,乙醇沉淀只能回收50%的DNA和RNA。AcrylCarrier是一种分子生物学级Acryl多聚物溶液,在乙醇沉淀时加入5-10μlAcrylCarrier即可明显提高核酸沉淀的得率,更可使痕量DNA的回收率达到95~98%,同时可选择性去除短引物(<22bp)片段和dNTP,用于沉淀回收标记探针,去除未标记dNTP。与生物源性的核酸沉淀助剂如糖原和
3、tRNA相比,AcrylCarrier本身绝无核酸污染也无DNA酶和RNA酶活性,同时不影响酶切、连接、转录、PCR、转化转染等,也不影响核酸电泳和DNA-蛋白相互作用。AcrylCarrier已成为最常用的核酸助沉剂。v产品储存:室温或者4℃保存一年,-20℃保存时间更长。v产品特点:-2-1.明显提高DNA或RNA沉淀的得率。2.痕量DNA和RNA(20pg)回收达95~98%。3.不影响酶切、连接、转录、PCR等反应。4.不影响电泳和DNA-蛋白相互作用。v使用方法:1.提高DNA或RNA沉
4、淀回收效率的使用方法:1)在1mlRNA或者DNA溶液中加入4-8µlAcrylCarrier,颠倒混匀。2)按照标准的乙醇沉淀法来沉淀RNA或者DNA,如加入3MPH5.2醋酸钠溶液(沉淀RNA时应该使用无RNA酶处理的溶液)到终浓度0.3摩尔(约1/10体积),然后加入2倍体积的无水乙醇,混匀后室温或者冰箱放置10-30分钟,12000转离心10分钟,弃上清,70%乙醇漂洗一遍,去上清,晾干沉淀,将沉淀重新溶解于适量DEPC处理水(RNA沉淀)或者其它如TE缓冲液中。2.提高DNA或RNA产率
5、的使用方法:每一毫升总RNA提取试剂TRIpure(TRIzol)或者DNA提取试剂DNAzol加入4-8µlAcrylCarrier,然后继续按照这些产品的说明书进行后续步骤。v注意事项:AcrylCarrier会增加RNA或者DNA的光密度值,因此测量光密度值的时候,为了消除AcrylCarrier影响,应该按照同样的实验过程做一个空白对照样品(使用同样的试剂和AcrylCarrier,但是不含有RNA或者DNA样品,将最后的AcrylCarrier沉淀溶解在和样品一样的溶解液中)。测量样品和
6、空白对照在260和280nm的光密度值。将样品的光密度值减去空白对照的光密度值,便可以得到实际的样品的光密度值。如果定量不需要很精确,也可以估测。完-2-
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