临床免疫学检验教案

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1、临床免疫学检验教案第次课授课时间：2007.9-12课程名称临床免疫学检验年级级专业、层次检验本科授课教师职称课型(大、小)大班理论课学时2学时授课题目（章、节）第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术基本教材或主要参考书王兰兰，主编.《临床免疫学与检验》北京:人民卫生出版社教学目的与要求：掌握：McAb及基因工程抗体和杂交瘤的概念。单克隆抗体制备技术的基本原理熟悉：单克隆抗体制备的基本过程，基因工程抗体的制备技术了解：单克隆抗体的应用，抗体库技术的应用和前景内容与时间安排，教学方法：内容：1、杂交

2、瘤技术的基本原理。2、单克隆抗体的制备。3、基因工程抗体制备4、单克隆抗体在医学中应用。时间安排：2.0学时教学方法：CAI讲授结合板书教学重点、难点：重点：1．杂交瘤技术的基本原理。2．单克隆抗体在医学中应用难点：制备单克隆抗体的基本过程。教研室审阅意见：教研室主任签名：基本内容手段课堂设计和时间分配第一节杂交瘤技术的基本原理一、杂交瘤技术二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存第二节单克隆抗体的制备一、单克隆抗体的产生二、单克隆抗体的纯化三、单克隆抗体的性质鉴定四、单克隆抗体的特性第三节基因工程抗体

3、制备一、人源化抗体　二、小分子抗体三、抗体融合蛋白四、双特异性抗体五、噬菌体抗体库技术第四节单克隆抗体的应用一、检验医学诊断试剂二、蛋白质的提纯三、小分子抗体的应用四、抗体融合蛋白的应用五、双特异抗体的应用六、抗体库技术的应用和前景简图简表示意图设问讨论讲解杂交瘤技术的基本原理20min讲解单克隆抗体的制备30min讲解基因工程抗体制备30min讲解单克隆抗体的应用20min抗体种类：第一代抗体多克隆抗体（polyclonalantibody)第二代抗体单克隆抗体（monoclonalantibod

4、y)第三代抗体基因工程抗体（geneticengineeringantibody)经过反复克隆化获得的抗体阳性杂交瘤细胞株应立即扩大培养（除及时冻存的细胞外）。因多次传代易引起染色体逐渐丢失而使细胞产生抗体能力逐渐减弱甚至消失，还应尽早使用获得的抗体阳性杂交瘤细胞株制备单克隆抗体。小结杂交瘤单克隆抗体制备技术的原理是利用聚乙二醇作为细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细 胞与具有在体外不断繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一 体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测筛选和

5、单个细胞培养（克隆化）,最终获得既能产生所需单克隆抗体,又能不断繁殖的杂交瘤 细胞系，将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，在其产生的腹水中即可得到高效价的单克隆抗体。20世纪80年代诞生了应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体基因按不同需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体，称为基因工程抗体。复习思考题、作业题1．杂交瘤技术是如何问世的？其基本原理是什么？2．什么是单克隆抗体？其特性和局限性如何？与多克隆抗体有何异同？3．杂交瘤细胞的克隆方法有哪些？4．细胞株冻融的原则是什么？5．

6、大量制备单克隆抗体的方法有哪些，各有哪些优缺点？6．单克隆抗体的性质鉴定的方法有哪些？7．叙述单克隆抗体的制备流程和应用。8．叙述基因工程抗体的概念和优点。下次课预习要点凝集反应的概念和类型实施情况及分析教学实施顺利、圆满完成。