snt 1071-2002 进出口食品中厌氧亚硫酸盐 还原梭

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1、SNT1071-2002进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭←:才己

2、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1071-2002进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法Methodforthedeterminationofanaerobicsulfite-reducingclostridiainfoodforimportandexport2002-0个16发布2002-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检菇总局SN/T1071-2002前占一一口本标准是按照GB/T1.1-1993((标准化工作导则第1单元:标准的起草与表述规则第1部分z标

3、准编写的基本规定》中的要求进行编写的。其中技术路线参考了国内外有关资料，经研究、改进和验证后，在普遍采用的平板计数法的基础上，增加采用最近似值法来计数厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌。本标准的附录A、附录B是标准的附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本标准主要起草人:曹际娟、寇运同、马惠藤、唐守亭。本标准首次发布。中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口食晶中庆氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法SN/T1071-2002Methodforthedetermin

4、ationofanaerobicsulfite-reducingc10stridiainfoodforimportandexport1范围本标准规定了进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌的检验方法。本标准适用于进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌的检验。2定义本标准采用下列定义:厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌一群厌氧、过氧化氢酶阴性、能将亚硫酸盐还原为硫化物的革兰氏阳性梭状芽胞杆菌。是食品、水、食品加工设备、食品生产环境等卫生状况的评估指标菌之一。3设备和材料3.1均质器。3.2恒温水浴箱。3.3恒温培养箱:36'C:::I:1'C或

5、460C土1;C。3.4厌氧培养装置。3.5菌落计数器。3.6吸管:1.0mL和10.0mL.分别具有0.1mL和1.0mL刻度。3.7培养皿:90mm或100mm。3.8低温冰箱。3.9显微镜。4培养基和试荆4.1氯化铀膜蛋白陈稀释液:见附录A中A1。4.2亚硫酸铁琼脂z见附录A中A2。4.3届肉培养基:见附录A中A3。4.43%过氧化氢榕液:使用前配制。4.5缓冲甘油-氯化铀榕液:见附录A中A4。5样晶制备5.1样品的贮存和运送中华人民共和国国家质量监督检验捡瘟总局2002-0个16批准2002-06.，01实施1SN/T1071-2002冷冻样品如不能立

6、即进行检验，应置于18C保存，非冷冻而易腐的食品，应加等量缓冲甘汕氯化销溶液(液体食品应加双料).置于4'C冰箱保存。运送样品时，应采取措施，防止样品中微生物数量和性质发生变化。5.2制样将样品解冻，取25g移入灭菌均质杯，加225mL氯化纳膜蛋臼陈稀释液，以8000r/min-IO000r/min均质2mino如为液体样品，贝IJ取样25mL.加人盛有225mL氯化纳膜蛋白陈稀释液的500mL稀释瓶中，摇匀.吸取此1'10样品匀液10mL.加入90mL氯化销膜蛋白陈稀释液中，充分混匀后根据样品污染情况做进一步的系列十倍递增稀挥。若检测厌氧

7、亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌的芽胞，可对10样品匀液进行75C20min或煮沸保持10min热处理，之后以流水迅速冷却至室温后再做进一步的系列十倍递增稀释.6检验步骤与计鼓「6.1平板计数法适用于检验未经加工处理的部偏爱厌氧量庐盐还附乒胞杆菌>1地川的食品。6.1.1接种和培养6.1.1.1对每一份试样，选用适宜的三?命阳的棒rr.分别用灭菌吸管吸取1mL，一式双份接种于每个灭菌的培养皿中。6.1.1.2倾注约15mL制备好的后水浴箱保温毛叫墨镜酸础。从制备最初稀释液结束到倾注培养基于最后一个平皿所用的时间不应超过15mino仔细将接;物和培养基充分混匀，水

8、平放置.使其凝固。L??6.1.1.3待混合物凝固后，再倾j:-J.O-mb-2~亮曹臻腊于E凝固的培养基上作为隔层。6.1.1.4待该隔层凝固后反转制备好的明于36C卢市吨养24h-48h.若对培养温度有特殊要求(如46C).可根据情况进行培养。6.1.2计数那些仅产生氢〔而不是硫化氢〈凡S~)的~氧菌生J长时也百还原的、非典型的普遍变黑，这种现象应计数.6.1.2.2从可计数的平板(具2口200个菌落)中唔取10行证实试验。对阳性结果进行计数。6.1.2.3平板典型菌落数乘以证实为丧氧堕费Ili盐还原梭，分别取培养物按7.1和7.2迸倍数即为样品中厌氧亚硫

9、酸盐还原梭状芽胞杆菌的计数，报告为厌氧