中国海耳鲍胚胎发育特征

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1、中国海耳鲍胚胎发育特征中国海耳鲍胚胎发育特征黄勃,邓中日,王小兵.,周智(1.海南大学海洋学院,海南海口570228;2.湖南城市学院化学与环境工程系,湖南益阳413000;3.海南大学公共实验中心,海南海口570228)摘要:利用显微技术对耳鲍(HaliotisasinineLinnaeus)的胚胎发育进行了研究,同时观察到孵化后的担轮幼虫.结果表明,耳鲍胚胎发育过程与皱纹盘鲍(Haliotisdiscushannai)和杂色鲍(Haliotisdiversicolor)基本相似,胚胎发育过程分

2、为受精期,第一极体放出期,第二极体放出期,2细胞期,4细胞期,8细胞期,16细胞期,32细胞期,桑椹期,原肠期和未孵化的担轮幼虫期.在海水质量密度l1024,水温28℃的条件下,耳鲍完成胚胎发育历时约5h30min,比皱纹盘鲍(海水质量密度1.022～l1023,水温22.5℃),杂色鲍(海水质量密度1.022～1.023,水温24～26℃)分别快1.5～2.5h和0.5h.耳鲍成熟卵卵径为0.18～0.19mm,担轮幼虫具有l束顶毛和2个纤毛环带.关键词:耳鲍(HaliotisasinineLi

3、nnaeus);胚胎发育中图分类号:Q954.4文献标识码:A文章编号:1000—3096(2007)04—0068—05耳鲍(HaliotisasinineLinnaeus)俗称驴耳鲍,隶属于软体动物门(Mollusea),腹足纲(Gastropoda),前鳃亚纲(Prosobranchia),原始腹足目(Archaeogastro—poda),鲍科(Haliotidae),鲍属(Haliotis),是一种海产经济贝类,具有极高的食用价值和药用价值.耳鲍与九孔鲍(Haliotisdiversic

4、oloraquatilis),杂色鲍(Haliotisdiversicolor)同属暖水性种,分布于热带和亚热带海域,在中国主要分布在南海海域,是海南重要的鲍鱼经济品种之一.目前国内外对耳鲍研究的报道不多~7],中国海耳鲍胚胎发育的研究未见报道.对中国海域耳鲍的胚胎发育进行研究,不仅可以了解其生殖生物学的相关知识,而且对它的人工育苗具有重要的指导作用.1材料和方法1.1成熟卵与精子的收集胚胎发育所用的成熟卵与精子均来自海南鲍鱼场.耳鲍经诱导产卵,排精后,立即收集圆形,呈分散状态,下沉底部的卵与活泼

5、的精子用于胚胎发育研究嘲.1_2人工授精将鲍卵收集到一个塑料容器中,卵子密度保持在3O粒/mL左右,再加入适量的精子密度为1×10个/mL的海水,同时不断轻轻搅动水体,以加速精卵结合.受精10min后洗卵,将上层的清水轻轻换出6O%左右,然后注入经紫外线照射过的海水.待卵下沉后,再次洗卵,共洗卵4次,洗卵水温稳定在28℃,海水质量密度稳定在l1024.1_3观察记录受精前,在显微镜下观察卵的形状和颜色;受精后,每隔10min取一次样,在显微镜下观察,计数;胚胎发育进入16细胞期后,每隔40min取

6、样,显微镜下观察,计数;桑椹期后每隔60min取样观察胚胎发育情况.在胚胎发育期间,保持水温和海水质量密度的相对稳定.1_4显微照相在显微观察,计数的同时,及时取样,用1O的收稿日期:2005—1卜20;修回日期:2006—0210基金项目:国家863计划项目(2004AA603130);国家自然科学基金项目(40366001);教育部科学技术研究重点项目(03146);海南省外国专家局项目(20031211)作者简介:黄勃(1965一),博士,教授,研究方向:海洋生物,水产养殖,E—mail:h

7、uangbohbl@163.corn68海洋科学/20O7年/第31卷/第4期福尔马林固定,返校后,0LYMPUSIX71倒置荧光显微镜观察和照相.2结果耳鲍成熟卵呈圆球形,米黄色,无粘性,分散状分布,卵径约为0.18～0.19mm(图1—1),属沉性的匀黄卵.耳鲍胚胎发育过程与皱纹盘鲍(Haliotisdiscushannai),杂色鲍基本相似,可分为受精期,第1极体放出期,第2极体放出期,2细胞期,4细胞期,8细胞期,16细胞期,32细胞期,桑椹期,原肠期和未孵化的担轮幼虫期,作者还观察到孵化

8、后担轮幼虫的出现(表1).耳鲍卵在海水质量密度1.024,水温28~C的条件下受精,约10min时,在动物极的顶端出现第一极体,同时也发现有第二极体的受精卵存在,分别约占7O%和3O(图1—2,图1—3).受精后20rain,进行第一次纵裂,在卵轴的平面上分为2个大小基本相等的细胞,为2细胞期(图1—4).此时镜检计数,2细胞期约占镜检胚胎总数的3O%;10rain后,约占6O%;再过10min后,约占98%.受精50min后,镜检计数,4细胞期的胚胎占25%,这是由于受精卵进行第