资源描述：
《膀胱尿路上皮癌fas相关死亡结构域蛋白表达及意义论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、膀胱尿路上皮癌Fas相关死亡结构域蛋白表达及意义论文【摘要】目的研究Fas相关死亡结构域(FADD)蛋白在膀胱尿路上皮癌（BUC）组织的表达，并探讨其与肿瘤生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测68例BUC及13例正常膀胱黏膜组织FADD蛋白表达。原位杂交法检测其中34例BUC组织FADDmRNA表达水平。结果正常膀胱黏膜FADD蛋白呈阳性表达。FADD的阳性率在不同组织学分级、不同临床分期的BUC组织中差异均有极显著性(χ2=15.38、11.34，P0.01)；复发组与未复发组FADD的阳性率分别为36.84%和53.33%,差异无显著意义(χ2=1.85，P0.05
2、)。BUC组织中FADDmRNA阳性率为44.12%,FADD蛋白阳性率为47.06%,两者差异无统计学意义(χ2=0.06，P0.05)。结论FADD表达异常在BUC的发展中可能起着重要作用,FADD阳性表达与BUC病理分级、浸润关系密切，但与BUC复发无关。【关键词】Fas相关死亡结构域蛋白；膀胱肿瘤；免疫组织化学；原位杂交［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetheFas-associateddeathdomain(FADD)proteinanditsbiologicalbehaviorinbladderurothelialcarcinoma(BUC
3、).MethodsTheexpressionsofFADDin68BUCand13normalbladdertissuemunohistochemicaltechnique.OfRNA.ResultsThevariousexprssionsofFADDalbladdermucosa;thedifferencesofpositiveexpressionongdifferenthistologicalgradingandclinicalstaging(χ2=15.38,11.34;P0.01);itsexpressioninrecurrentgroupandnon-recurrentg
4、roupRNA(χ2=0.06,P0.05)。ConclusionTheabnormalexpressionofFADDmayplayanimportantroleinthedevelopmentofBUC.ThepositiveexpressionofFADDinthecanceriscloselyrelatedtothepathologicalgradingandinvasion,.freelainprotein;Bladderneoplasmas;Immunohistochemistry;InsituhybridizationFas相关死亡结构域(FADD)蛋白能与Fas相互
5、作用而诱导细胞凋亡,在细胞凋亡信号传导通路中起重要作用,但其在膀胱尿路上皮癌（BUC）发病过程中的作用尚不清楚。我们分别采用免疫组化SP法、原位杂交法检测BUC组织中FADD蛋白及mRNA表达,并探讨FADD与BUC生物学行为之间的关系。现报告如下。1材料与方法1.1标本随机选取我院1999~2002年经手术切除的初发性BUC石蜡标本68例，男49例，女19例；年龄30~85岁.freel厚连续组织切片，分别进行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及原位杂交。所有病例术前均未经放疗、化疗及免疫治疗。1.2FADD蛋白检测采用免疫组化SP法。山羊抗人FADD单克隆抗体为SantaCru
6、zBiotech公司产品,其工作浓度为1∶30；兔抗山羊血清及SP试剂盒为北京中山生物有限公司产品；DAB为Sigma公司产品。用已知肺癌阳性切片作阳性对照，用PBS代替山羊抗人FADD单克隆抗体作阴性对照，DAB显色，苏木精复染，中性树脂封片。具体操作步骤按试剂盒说明书进行。结果判定标准：FADD蛋白阳性细胞为胞浆内有棕黄色细颗粒；每张切片随机选择5个高倍视野,每视野计数200个细胞(癌组织计数癌细胞,正常膀胱黏膜组织计数上皮细胞)，无阳性反应为阴性(-),阳性细胞数25%为弱阳性(+),25%～75%为中度阳性(),75%为强阳性()。1.3FADD核酸原位杂交探针序列：5
7、′-GACCCGTTCCTGGTGCTGCT-GCACTCGGTG-3′;5′-AGCTGGAGCGCGTGCAG-AGCGGCCTAGACC-3′;5′-GAGCAGAACGACCTGGAGCCCGGGCACACC-3′。实验严格按说明书进行,原位杂交阳性对照片由试剂盒提供,省去探针步骤为阴性对照。最后用DAB显色,镜下观察,FADDmRNA阳性细胞为胞质内有蓝色颗粒。结果判定标准:采用半定量分析方法（AB值法），连续观察5个高倍视野，每视野计数200个癌细胞。以染
