硝基酪氨酸在2型糖尿病大鼠肾脏的表达及瑞舒伐他汀钙的影响论文

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1、硝基酪氨酸在2型糖尿病大鼠肾脏的表达及瑞舒伐他汀钙的影响论文【摘要】目的观察硝基酪氨酸在2型糖尿病模型大鼠肾脏的表达及瑞舒伐他汀钙(rosuvastatin)对其的影响。方法将大鼠分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)、瑞舒伐他汀钙治疗组(N)，比较各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和硝基酪氨酸(NT)含量，同时观察血糖、血胰岛素、肾功能和肾脏形态变化。结果与正常组比较，糖尿病组肾组织中MDA含量明显上升(P0.05)，SOD活性显著下降(P0.05)，NT增多(P0.05)，肾功能和肾脏形态受损，而瑞舒伐他汀钙治疗组的上述表达较糖尿病

2、组明显改善。结论硝基酪氨酸在糖尿病肾病中的表达明显增加.freelalrats(C)，diabeticrats(D)，diabeticratstreatedalonaldehyde(MDA)，activityofantioxidantenzymesincludingsuperoxidedismutase(SOD)andnitrotyrosine(NT)intherenaltissueongthegroups.Inaddition，bloodglucose，serumcreatinine(Cr)bloodureanitrogen(BUN)esured;therenal

3、tissueicroscopyandelectronmicroscopy.Resultsparedalgroup，thelevelofBUN，Cr，MDAandNTindiabeticratsentsignificantlyhigherthannormalcontrols.Butthoseprovedinthetreatedgroupobviously.ConclusionOxidativestresstakeanimportantroleinthedevelopmentofdiabeticnephropathy.TheexpressionofNitrotyrosi

4、neintype2diabeticratsaybethepossiblemechanismoftheneohroprotectiveactionofRosuvastatin.Keyol/L、pH为4.2的枸橼酸缓冲液溶解，临用前配制);瑞舒伐他汀钙(商品名瑞舒伐他汀钙，阿斯利康制药有限公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、硝基酪氨酸检测试剂盒(美国Cayman公司)。1.3仪器紫外分光光度计(上海分析仪器厂);自动生化分析仪(美国Technicon公司);磁酶联免疫测定仪(北京倍爱康生物技术有限责任公司)。2方法2.1动物分组与处理大鼠适应性饲养1周后

5、，按体重随机分为正常对照组(C组，7只)和实验组(B组，18只)。C组给予普通食料，B组给予高糖、高脂饮食(由常规饲料加15%蔗糖、5%猪油、0.5%胆固醇配制而成)。4周后B组腹腔注射STZ(注射量为35mg/kg),72h后经尾静脉采血测空腹血糖(FBG)。以禁食后血糖水平≥空白组均数±3倍标准差为标准，判定2型糖尿病大鼠模型是否建立成功。成功者(共14只)再随机分为糖尿病组(D组，7只)和糖尿病瑞舒伐他汀钙治疗组(N组，7只)，N组以瑞舒伐他汀钙500mg/(kg?d)灌胃，C组、D组则给予相同剂量的蒸馏水各组大鼠均单笼饲养，自由进食、饮水，给药8周后代谢笼收

6、集24h尿液，低温离心后测尿微量白蛋白。后麻醉大鼠，自下腔静脉取血，摘取双侧肾脏，称重，取部分皮质以4%的多糖甲醛固定，部分以3.7%的戊二醛液固定。2.2检测项目与方法2.2.1生化指标的检测血糖水平用葡萄糖氧化酶法检测，血胰岛素水平采用磁酶联免疫吸附法检测，血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)由自动生化分析仪检测，24h尿微量白蛋白采用放射免疫法测定。2.2.2肾组织匀浆中MDA含量、SOD活性的测定将10%的组织匀浆低温离心，取上清液，采用化学比色法测定光吸收度，计算MDA、SOD含量。2.2.3肾组织免疫学检查常规脱蜡，封闭，一抗37°C孵育2h,4°C冰箱过

7、夜，标记二抗，做免疫染色，应用高清晰度彩色免疫图像分析系统(IPP55.0)分析，测定肾小球(平均光密度)直径。2.2.4肾脏组织电镜观察肾组织固定，脱水，包埋，切片，染色，在Hitachi-7500透射电镜下观察。2.3统计学处理实验数据以±s表示，应用SPSS13统计软件进行处理，两组间数据采用ANOVA检验，若方差不齐，采用非参数统计检验，P0.05为差异有显著性。3结果3.1各组大鼠血糖、肾功能及病理形态的变化见表1。表1各组大鼠尿白蛋白、血糖、BUN、Cr的变化3.2正常对照组、糖尿病组、糖尿病瑞舒伐他汀钙治疗组病理改变见图1。镜下观察发现，D组大鼠G