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《金银花提取物体外抗甲型流感病毒fm1株的研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、金银花提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的研究论文.freelg/mL时,对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用(P0.001),而在100mg/mL时的预防作用明显优于阳性对照病毒唑组(P0.05)。结论金银花提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株。【关键词】甲型流感病毒；金银花提取物；绿原酸；鸡胚Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofextractsfromFlosLoniceraeinhibitinginfluenzaAvirusFM1strain.MethodUset
2、hemethodofhemagglutinationtest,determinethehemagglutinationinhibitiontiterthatextractsfromFlosLoniceraeinhibitinginfluenzaAvirusinvitroandinembryonatedegg.ResultparedagglutinationinhibitiontiterofextractsfromFlosLoniceraegroup1hourto24hour,andthedepressantef
3、fectg/mL,extractsfromFlosLoniceraehadthepreventativeeffectandtherapeuticaleffectonembryonatedegginfectedbyinfluenzaAvirus(P0.001).Attheconcentrationof100mg/mL,thepreventativeeffectofextractsfromFlosLoniceraegroupFlosLoniceraecansuppressinfluenzaAvirusFM1stra
4、inactively.KeyFlosLonicerae；ChlorogenicAcid；embryonatedegg本实验对金银花体外抗流感病毒作用进行系列研究,旨在阐明该药在中药复方银翘散中抗流感病毒作用的物质基础,为将该药及其有关复方研制成治疗病毒性呼吸道疾病的现代(复方)中药奠定基础。1实验材料1.1药物及主要试剂金银花饮片购于辽宁中医药大学附属医院门诊药局,经辽宁中医药大学中药分析教研室张振秋教授鉴定为忍冬科植物忍冬的花蕾金银花。利巴韦林注射液(江苏吴中实业股份有限公司,批号060208)；绿原酸对照品
5、(自配,浓度0.1112mg/mL)。1.2病毒甲型流感病毒鼠肺适应株A/FM1/47(H1N1),中国预防医学科学院病毒研究所提供,冻存于辽宁中医药大学病毒室,经鼠肺、鸡胚传代后为FM1M9E2M1E3M2E4M1E5。1.3鸡胚9日龄尼克白种鸡胚,SPF级,购于辽宁省益康生物制品厂。1.41%鸡红细胞悬液采集健康公鸡血,阿氏液抗凝,生理盐水1500r/min离心洗涤3次,弃上清,以无菌生理盐水配制成1%悬液,4℃冷藏备用1。1.5主要仪器Ⅱ级生物安全柜(美国Baker公司,型号：SG403TXCE)；高效液
6、相色谱仪(日本岛津SPD-10AVP)；N-2000双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工作研究所)；低温高速离心机(德国Heraeus,型号：Biofuge28RS)；台式压力蒸汽灭菌器(沈阳盛达生物电子设备有限公司)；电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)；AS3120电子超声仪。2实验方法2.1金银花提取物的制备及其鉴定2.1.1药物提取电子天平称量金银花饮片放入圆底烧瓶中,加入配制好的80%乙醇14倍量,电热套加热回流2h；第1次提取后倾倒滤液,药渣再加80%乙醇10倍量,加热回流1h；合并滤液,加热浓缩,
7、水浴箱通风橱加热挥发成膏状,置于电热烘箱内烘干,研成粉末避光冷藏备用。用于体外实验时,用生理盐水配成浓度为400mg/mL的溶液,高速离心机4000r/min离心30min,取上清,高温高压灭菌后4℃冷藏备用。2.1.2供试品溶液的制备精称样品粉末0.1751g,置锥形瓶中,加50%甲醇50mL定容,超声30min；放冷,过滤,取续滤液5mL,入棕色量瓶保存待测,检测时用0.45μm微孔滤膜过滤。2.1.3标准曲线绘制及样品的测定吸取对照品溶液5μL注入液相色谱仪,以乙腈-0.4%磷酸(13∶87)为流动相,柱
8、温为35℃；流速为1.0mL/min,于327nm波长处检测；以绿原酸峰面积为纵坐标,绿原酸量(μg)为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程。并在上述色谱条件下测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积。2.2流感病毒增毒及其在鸡胚上半数感染量的测定将病毒原液接种于局部消毒后的9日龄SPF鸡胚尿囊腔,每胚接种0.1mL,石蜡封口,33～35℃温箱孵育48h,4℃过夜。收取尿囊液,红细胞凝集试验测
