和络舒肝胶囊对日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用研究论文

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时间:2018-07-11

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1、和络舒肝胶囊对日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用研究论文【关键词】胶囊摘要:目的研究和络舒肝胶囊对小鼠日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用及其机理,并与吡喹酮的作用对比。方法80只小鼠随机分为4组。其中3组小鼠感染日本血吸虫8周后,分别以和络舒肝胶囊0.1粒/只/d治疗8周、吡喹酮500mg(kgd)-1治疗2d以及不作任何治疗(实验对照组),第4组小鼠作为正常对照组。应用免疫组化染色及HE染色法,观察和分析和络舒肝胶囊及吡喹酮治疗前后各组小鼠肝组织病理改变及血小板衍生生长因-BB(platelet-derivedgrosofHeluoshuganCapsule

2、onSchistosome-infectedMiceechanismsofHeluoshugancapsuleonschistosome-infectedmiceiceajaponicum.Aftereighticeeverydayfor8g/(kgd)for2daysandtheotherentalcontrolent.Thefourthgroupalcontrol.ImmunohistochemicaltechnologyandHEstainingiceinfectedbeforeandaftertreatments.ResultsHeluoshu

3、gancapsuletreatmentsignificantlyrelievedpathologicdamagesinlivertissueentalcontrol(P0.01)andthegrouptreatede-infectedmiceajaponicum;Liverfibrosis;PDGF-BB;Collagen日本血吸虫病的肝纤维化是导致门静脉高压、腹水和上消化道出血的主要原因,也是日本血吸虫病患者死亡的主要原因,目前国内外尚无理想的抗纤维化药物。文献报道,和络舒肝胶囊有保护肝损伤及抗纤维化作用[1,2],但未见其对血吸虫病肝纤维化作用的研

4、究。本文研究和络舒肝胶囊对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织中血小板衍生生长因-BB(platelet-derivedgrol/(只d);②吡喹酮治疗组:感染尾蚴8周后用吡喹酮灌胃治疗2d,剂量为500mg(kgd)-1,溶于生理盐水,1ml/(只d);③和络舒肝胶囊组:感染尾蚴8周后用和络舒肝胶囊灌胃治疗8周,剂量为0.1粒/(只d),溶于生理盐水,1ml/(只d);④正常对照组:未感染血吸虫尾蚴,正常方法饲养16周。第16周末分别取各组小鼠肝组织作病理学检测和免疫组化分析。1.3检测项目、试剂及方法1.3.1肝组织切片HE染色光镜检查常规石蜡切片经HE染色

5、后光镜下观察肝组织的病理变化。肝纤维化级别标准依病情轻重分3级,“+”为汇管区有轻度纤维组织增生,并向外伸展;“++”为较明显的纤维组织增生,并包绕肝小叶或与邻近汇管区纤维组织相互衔接;“++”肝组织纤维化;纤维组织沿门静脉分支高度增生,肝组织被挤压。1.3.2PDGF-BB和Ⅰ,Ⅲ型胶原的免疫组化检测1.3.2.1试剂兔抗小鼠PDGF-BB抗体(美国SANTACRUZ生产)、兔抗小鼠Ⅰ型及Ⅲ型胶原抗体、SABC试剂盒、包括正常山羊血清封闭液、生物素化山羊抗兔IgG、SABC试剂(链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)、抗原修复液、复合消化液、DAB显

6、色试剂盒等,均购自武汉博士德生物工程有限公司。1.3.2.2免疫组化染色方法采用链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法:3%H2O2室温10min灭活内源性酶,蒸馏水洗2min×3次,滴加复合消化液,室温消化5min,0.01mol/LPBS洗2min×3次,滴加正常山羊血清封闭液,室温孵育10min,甩去多余液体,分别滴加兔抗小鼠PDGF-BB兔抗小鼠Ⅰ型和Ⅲ型胶原,37℃孵育30min,0.01mol/LPBS洗2min×3次,滴加生物素化山羊抗兔IgG,37℃孵育20min,0.01mol/LPBS洗2min×3次,滴加SABC试剂,37℃孵育2

7、0min,0.01mol/LPBS洗5min×4次,DAB显色,镜下控制反应时间,蒸馏水洗涤。脱水,透明,封片,显微镜下观察。1.4结果分析免疫组化结果采用MPZAS-500多媒体彩色病理图文分析系统,计算平均积分光密度(integrallightdensity,ILD),以±s表示。两组间比较采用t检验。肝脏纤维化程度为等级资料,用Ridit分析。P0.05表示有显著统计学差异,P0.01表示有极显著统计学差异。2结果2.1肝组织普通病理变化光镜下,正常对照组小鼠肝组织未见任何病变。实验对照组、吡喹酮组及和络舒肝胶囊组与正常组相比,肝组织病理学观察发

8、现众多慢性虫卵肉芽肿,其虫卵周围包绕梭形细胞和胶原纤维,亦可见少部分急性虫卵肉芽肿,汇管区有大

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