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1、欧亚旋覆花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究论文【摘要】目的观察欧亚旋覆花总黄酮（totalflavonesextractedfromInulabritannicaL，TFIB）对大鼠局灶性脑缺血-再灌注脑组织损伤的保护作用，并进一步探讨其作用机制。方法采用大脑中动脉栓塞法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，缺血2h，再灌注22h后，以盐酸2,3,5三苯基四氮唑（TTC）染色法测定脑梗塞面积,比色法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用“5分法”进行神经症状评分。
2、结果TFIB(25，50，100mg·kg-1.freelInulabritannicaL.(TFIB)oncerebralischemia-reperfusioninjuryinratsanditsmechanism.MethodsThemodeloffocalreperfusioninjuryaftercerebralischemiainratsadebymiddlecerebralarteryocclusion.For2h,follochloride.Spectrophotometricassayinetheac
3、tivityofsuperoxidedismutase(SOD)andthecontentofmalondialdehyde(MDA)inbraintissue.Neurologicaldeficit.ResultsTFIB(25,50,100mg·kg-1,ip)significantlydecreasedneurologicaldeficitscoresandreducedthepercentageofinfarctionintheipsilateralhemisphereparedodelgroup.TFIBsi
4、gnificantlyincreasedSODactivityanddecreasedMDAcontent.ConclusionTFIBprovidessignificantprotectionagainstcerebralischemia-reperfusioninjuryinrats.KeyInulabritannicaL.;Cerebralischemia-reperfusion;Antioxidantaction缺血性脑损伤是以微循环下降为特征的神经系统疾病。临床上脑缺血发生后,.freelInulaBrita
5、nnicaL.,TFIB)对脑缺血-再灌注损伤的作用,目前尚无报道。本实验采用大鼠大脑中动脉梗塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,观察TFIB对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤大脑的保护作用。1材料1.1药品与试剂欧亚旋覆花总黄酮提取物（自制）；SOD及MDA试剂盒(南京聚力生物医学工程研究所）；2,3,5-三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltet2razoliumchloride,TTC),其他试剂为进口或国产分析纯。1.2动物健康雌性SD大鼠，体重230～270g，
6、由河北医科大学实验动物中心提供，清洁II级，动物合格证号：冀医动字第06057号。2方法2.1欧亚旋覆花总黄酮的制备取欧亚旋覆花适量加10倍量水，回流提取3次，1h/次，合并提取液浓缩；然后用AB-8大孔吸附树脂柱富集，提取物上样浓度为0.2g/ml，用70%乙醇进行洗脱，冷冻干燥，测得总黄酮含量为89.5%。2.2MCAO模型的制备［6～9］SD大鼠以10％水合氯醛腹腔注射麻醉（0.35ml/100g体重），沿正中纵向剪开颈前皮肤,游离右侧颈总动脉(moncarotidartery,CCA)、颈外动脉(externa
7、lcarotidartery,ECA)及颈内动脉(internalcarotidartery,ICA),将尼龙线(外涂硅胶,头端直径为0.26～0.30mm)沿ECA插入ICA约18mm(从ECA，ICA分叉处算起)堵住大脑中动脉头端。缺血1.5h后,抽出尼龙线进行再灌注22h。进行行为评分参考ZeaLonga的5分制评分标准：①0分：正常，无神经损伤症状；②1分：对侧前爪部分屈曲或完全屈曲；③2分，向偏瘫侧转圈；④3分，向偏瘫侧倾倒；⑤4分，不能自发行走，意识丧失。2.3分组与给药将造模成功的动物随机分为5组，即假手
8、术组、模型组和TFIB不同剂量组(25,50，100mg·kg-1)。假手术组、模型组在MCAO前1.5h通过腹腔注射(ip)给予溶剂，不同浓度的TFIB均在MCAO前1.5h给予(ip)。2.4神经症状评分及大脑梗塞面积的测定模型组在MCAO前1.5h通过腹腔注射(ip)给予溶剂。不同浓度的TFIB均在MCAO前1.5h给予(i
