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时间:2018-07-11
《生物:2.1《微生物的实验室培养》学案(1)(新人教版选修1)》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、课题1微生物的实验室培养【课程目标】了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作基础知识一、培养基1.概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。2.营养构成:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微
2、生物的结构物质和分泌物,并提供能量。氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:(一)获得纯净培养物的关键是,具体操作如下:1.对实验操作的、操作者的和进行。2.将用于微生物培养的、和等器具进行。3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。(二)消毒和灭菌1.消毒是指。常用的方法有、、消毒法。2.灭菌是指。常用的方法有:、、灭菌。分别适用于那些
3、用具?〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为,并维持min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅盖,其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养:本实验所用的培养基是,本实验可分成和两个阶段进行。一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是:、、、、。〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作
4、要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?2.倒平板:待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:①在火焰旁右手拿,左手;②使锥形瓶的瓶口;③左手将培养皿,右手,立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后,将平板。〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?〖思考8〗倒平板的目的是什么?〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?二、纯化大肠杆菌微生物接种:最常用的是法和法。另外还有穿刺接种和斜面接
5、种等。1.平板划线法是的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:①将在酒精灯火焰上灼烧直至。②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到的目的。④将冷却的接种环伸入到。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙,把接种环,盖上皿盖,不要划破培养基。⑦灼烧接种环,冷却后从划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。⑧将平板培养。〖思考11〗取菌种前灼烧接种环的目的是什么?为什么除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环?取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是?最后灼烧
6、接种环的目的是?在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是?2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。 系列稀释操作:①取盛有mL水的无菌试管6支,编号101、102、103、104、105、106。②用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次使之混匀。③从101倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。依此类推。〖思考12〗系列稀释操作的注意事项是什么?〖思考13〗涂布平板操作的步骤是什么?结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么?,若
7、有菌落形成,说明什么?2 在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落颜色?形态?3 培养12h和24h后的菌落大小?;菌落分布位置?原因?〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因?〖思考15〗频繁使用的菌种利用什么法保存?长期保存菌种的方法是什么?典例精析类型一微生物的营养要素【例1】下列关于微生物营养的说法,正确的是……………………………………()A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量c.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也能提供能量类型二无菌技术素【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方
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