sn∕t 3507-2013 进出口纺织品中山羊绒和绵羊毛的鉴别 pcr法和实时荧光pcr法

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1、!中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!"!#!"#$"%#&!进出口纺织品中山羊绒和绵羊毛的鉴别$%&法和实时荧光$%&法'()*+,-,./+,0*0-./123)4)/*(5006,*+)7+,6)1-04,3804+/*()7804+"$%&3)+20(/*(4)/69+,3)-6:04)1.)*.)$%&3)+20(%#&!9#!9#&发布%#&!9#'9&(实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局!"!#!"#$"%#&!前!!言!!本标准按照!"!#$%$"&''(给出的规则起草#请注意本文件的某些内容可能涉及专利#本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任#本标准由国家

2、认证认可监督管理委员会提出#本标准起草单位$中华人民共和国福建出入境检验检疫局#本标准主要起草人$邵碧英%林志武%陈文炳%缪婷玉%彭娟%柯家骥#!!"!#!"#$"%#&!进出口纺织品中山羊绒和绵羊毛的鉴别$%&法和实时荧光$%&法&!范围本标准规定了纺织品中山羊绒%绵羊毛鉴别的)*+和实时荧光)*+方法#本标准适用于纺织品中山羊绒%绵羊毛)*+法和实时荧光)*+法的定性鉴别#%!规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的#凡是注日期的引用文件&仅注日期的版本适用于本文件#凡是不注日期的引用文件&其最新版本'包括所有的修改单(适用于本文件#!"!#,,-&!分析实验室用水规格和试验

3、方法!"!#$(.(/%&!转基因产品检测!实验室技术要求!!术语和定义下列术语和定义适用于本文件#!%&聚合酶链式反应!'()*+,-./,01.23-,.042(3)$%&一种模拟天然012复制的体外扩增法&在012聚合酶催化下&以母链012为模板&以特定引物为延伸起点&以.种单核苷酸'31#)(为底物&通过变性"退火"延伸的循环反应&使极少量的012的特定片段&在短短几小时内扩增上百万倍#!%%实时荧光$%&!-,.)542+,6)7(-,/0,30,$%&在)*+反应体系中加入荧光基团&利用荧光信号积累实时监测整个)*+进程&最后通过曲线对未知模板进行定量或定性分析的方法#'!缩略

4、语下列缩略语适用于本文件#45$碱基对'4678569:(*;值$每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数'<=<>8;?:87?@>3(012$脱氧核糖核酸'38@A=:94@BC>89<6<93(0##$二硫疏糖醇#31#)$脱氧核苷酸三磷酸'38@A=:94@BC<>8@7938;:95?@75?6;8("!原理用试剂盒法提取样品012#针对山羊%绵羊的线粒体012序列设计引物和探针&通过单一)*+%实时荧光)*+技术&对012中的山羊成分%绵羊成分分别进行特异性扩增&根据实验结果&判定该样品中是否含有山羊绒%绵羊毛#$!"!#!"#$"%#&!(!试剂(%&!实验用水应

5、符合!"!#,,-&中一级水的规格##F系统结合使用($参见附录2中2%$#$((%%!组织和毛发提取试剂盒'与012DE(%!!&G!"#)*+F67;8:F9A$'H$I!"J!"#012聚合酶&/''"K@>!J31#)&&'KK@>!J#:97LM*>'5M-HN(&$''KK@>!JO*>&NKK@>!JFP*>&其他稳定剂和增强剂&Q&'R保存#&#F')8:S8<;+86>#9K8('&G($见2%&#(%'!$%&'()*)!"#(%"!(/T或$''T乙醇#(%(!琼脂糖#(%$!溴化乙锭#(%)!012K6:U8:#(%*!#V溶液'5M-%'(#(%&#!/G#"V缓

6、冲液#$!仪器与设备$%&!冰箱$.R#Q&'R#$%%!天平$感量'%''$P#$%!!分析研磨机#$%'!剪刀#$%"!微孔干浴器或水浴锅#$%(!瞬时离心机#$%$!涡旋仪#$%)!$%/KJ磁分离架#$%*!微量可调移液器及枪头$$'"J%&'"J%$''"J%&''"J%$'''"J#$%&#!$%/KJ离心管#$%&&!)*+薄壁管#$%&%!实时荧光)*+光学反应管#$%&!!超净工作台#$%&'!)*+仪#$%&"!实时荧光定量)*+仪#$%&(!电泳装置#$%&$!凝胶成像仪#)!取样纱线$从不同的管纱%筒纱或绞纱上随机取样&共取约$P的纱样#织物$从不同位置剪取&共取约

7、$P的织物#$(!给出这一信息是为了方便本标准的使用者&并不表示对该产品的认可#如果其他等效产品具有相同的效果&则可使用这些等效产品#&!"!#!"#$"%#&!*!制样用剪刀将样品剪碎&经分析研磨机打散%混匀&再用剪刀尽量剪碎至纤维长度&KK#NKK&再次用分析研磨机混匀#&#!8"9的提取&#%&!称取约/KP试样&放入$%/KJ离心管中&每个样平行提取&管&加$''"J0##'$K@>!J(和W/"J蛋白酶O储存液

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