资源描述:
《凝胶过滤层析参数对ev71病毒粗提液分离效果的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、凝胶过滤层析参数对EV71病毒粗提液分离效果的影响第42卷第9期2011年9月东北农业大学JournalofNortheastAgriculturalUniversity42(9):136~140Sep.2011凝胶过滤层析参数对EV71病毒粗提液分离效果的影响杨永华,邵强,皮川真,杨全中,苏志国(1.河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007:2.华兰生物工程有限公司,河南新乡453007;3.中国科学院过程工程研究所,北京lool9o)摘要:通过凝胶过滤层析达到分离纯化EV71肠道病毒粗提液,以提高EV71的纯度.选用不同的洗脱流速
2、,不同样品上样量,不同的缓冲溶液的pH值和不同盐浓度对EV71肠道病毒粗提液进行连续洗脱.结果表明,凝胶过滤层析的洗脱流速,样品上样量,缓冲溶液的pH值和盐浓度对EV71病毒均能不同程度地影响EV71病毒粗提液的分离效果.在试验范围内,选择洗脱流速为60cm?h~,样品的上样量为5%CV,缓冲溶液的pH为7.5和盐浓度为0.1tool?L-时,对EV71病毒粗提液的分离效果比较理想.关键词:凝胶过滤层析;分离;EV71;手足口病中图分类号:TQ2028-3文献标志码:A文章编号:1005—9369(2011)09—0136—05Optimi
3、zationofgel-filtrationchromatographyparametersforsepara-tingvirusfrOmcrudeextractsofEV71/YANGYonghua',SHAOQiang',PIChuan-zhen,YANGQuanzhong',SUZhiguo.(1.CollegeofLifeSciences,HenanNormalUnversity,Xinx-iangHenan453007,China;2.HualanBiologicalEngineeringInc.,XinxiangHenan453
4、007,Chi-na;3.InstituteofProcessEngineering,ChineseAcademyofScience,Beijing100190,China)Abstract:Theinfluenceofgel?filtrationchromatographyflowrate,thesampleweight,bufferpHvalueandsaltconcentrationonseparationperformanceoftheproteincrudeextractsofEV71wereinvestigated.Theres
5、ultsshowedthatalltheabovefourfactorscouldaffecttheseparationperformanceofthecrudeextractsingel-filtrationchromatographybyvariousdegrees.Inthescopeofthepresenttests,thebestseparationperformancewasachievedusing60cm?h..rate,5%CVsample,pH7.5bufferandwith0.1mo卜L''saltcOncentrat
6、iOn.Keywords:gelfilteringchromatography;separation;EV71;handfootandmouthdisease人肠道病毒7l型(EV71)是小RNA病毒科,人肠道病毒属的成员,主要在肠道内进行复制口.EVT1的病毒颗粒为二十面体立体对称的球形结构,无包膜和突起,直径大约在24~30nm,核酸为单股正链RNA.病毒粒子的衣壳由60个亚单位构成,后者又是由四种衣壳蛋白VPI—VP4拼装成的五聚体样结构】.自1969年,第一株EV7]病毒从美国加利福尼亚州一名患有神经系统疾病的婴儿体内分离出来p】.
7、从此以后,EV71在全球范围内逐渐流行,从2O世纪7O年代主要在保加利亚,匈牙利等欧洲国家流行,直至2O世纪9O年代起,EVTI开始肆虐东南亚地区,日本,马来西亚,中国台湾,中国大陆等地均深受其害.EVT1感染主要引起患者手足口病,在临床上与柯萨奇病毒A16(CoxsakieA16,CA16)感染所引起的手足口病难以区别,儿童感染后部分出现多种与神经系统相关的严重并发症,包括神经源性肺水肿,脑干脑炎和心肌炎心衰等,神经源性肺水肿多收稿日期:2010—12—31基金项目:河南省基础与前沿技术项目(082300450300)作者简介:杨永华(1
8、983一),女,硕士研究生,研究方向蛋白质化学与分子生物学.E—mail:yangyonghua666121@163.com通讯作者:邵强,教授,研究方向为蛋白质工程研究.E-m