dna复制、rna转录、蛋白质翻译

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1、第十一章DNA复制、RNA转录、蛋白质翻译第一节DNA的复制与修复第二节RNA的生物合成和加工第三节蛋白质的生物合成第一节DNA的复制与修复DNA是由四种脱氧核糖核酸所组成的长链大分子,是遗传信息的携带者。生物体的遗传信息就贮存在DNA的四种脱氧核糖核酸的排列顺序中。DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代;通过转录和翻译,将遗传信息传递给蛋白质分子,从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。一.DNA的复制(一)、半保留复制DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有

2、一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制。(二)、DNA复制的起始点和方式复制子是DNA能独立进行复制的单位。需在特定的位点起始,可能还有终点。在原核生物中,复制起始点通常为一个,复制方向大多是双向的,也有单向的,而在真核生物中则为多个复制起始点。(三)、DNA聚合反应有关的酶1.DNA聚合反应DNA聚合反应的特点:(1)以4种dNTP为底物;(2)DNA模板;Mg2+(3)带3’-OH末端的引物;(4)延长方向5’3’;(5)产物DNA的性质与模板相同。DNA聚合酶Mg2+2.DNA聚合酶在原核生物(大肠杆菌)中,目前发现的DNA聚合酶有五种,研究

3、较多的有三种,分别命名为DNA聚合酶Ⅰ(polⅠ),DNA聚合酶Ⅱ(polⅡ),DNA聚合酶Ⅲ(polⅢ),这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。参与DNA复制的主要是polⅢ和polⅠ。polⅠ为单一肽链的大分子蛋白质,可被特异的蛋白酶水解为两个片段,其中的大片段称为Klenow片段,具有5‘→3’聚合酶活性和3‘→5’外切酶的活性。另一小片段有5‘→3’外切酶的活性。polⅢ由十种亚基组成,其中α亚基具有5‘→3’聚合DNA的酶活性,因而具有复制DNA的功能;而ε亚基具有3‘→5’外切酶的活性,因而与DNA复制的校正功能有关。DNA-polⅠ和DNA-

4、polⅡ为修复酶,DNA-polⅢ真正起复制作用的酶,为复制酶。原核生物中的三种DNA聚合酶核酸外切酶活性3′→5′外切酶活性5′→3′外切酶活性3、DNA连接酶催化一条DNA链的3′末端与相邻的另一条DNA链的5′末端之间的磷酸二酯键的合成。与同一互补链结合并相邻。(双链DNA切口)条件:①需一段DNA片段具有3‘-OH,而另一段DNA片段具有5’-Pi基;②未封闭的缺口位于双链DNA中,即其中有一条链是完整的;③需要消耗能量。(四)DNA的半不连续复制半不连续复制:双链DNA分子的两条链是反向平行的。而DNA聚合酶的方向都是5’3’。当DNA复制时,一条

5、链是连续合成的,称前导链,而另一条在5’3’方向合成小片段DNA(冈崎片段),然后通过酶将这些片段连接起来,这不连续合成的DNA链为滞后链。冈崎用电子显微镜看到了DNA复制过程中出现一些不连续片段,这些不连续片段只存在与DNA复制叉上其中的一股。后来就把这些不连续的片段称为冈崎片段。前导滞后1、复制的起始由蛋白因子识别复制起始点解旋解链,形成复制叉:由拓扑异构酶和解链酶作用,使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开,碱基间氢键断裂,形成两条单链DNA。单链DNA结合蛋白(SSB)结合在两条单链DNA上,形成复制叉。DNA复制时,局部双螺旋解开形成两条单链,这种叉状结

6、构称为复制叉。引发体组装:蛋白因子以及引物酶一起组装形成引发体。引发:在引物酶的催化下,以DNA为模板,合成一段短的RNA片段,从而获得3'端自由羟基(3'-OH)。(五)DNA复制的过程(原核生物)起始、延长、终止拓扑异构酶(又称DNA旋转酶)拓扑异构酶Ⅰ可使DNA双链中的一条链切断,松开双螺旋后再将DNA链连接起来,从而避免出现链的缠绕。拓扑异构酶Ⅱ可切断DNA双链,使DNA的超螺旋松解后,再将其连接起来。解螺旋酶又称解链酶或rep蛋白,是用于解开DNA双链的酶蛋白,每解开一对碱基,需消耗两分子ATP。单链DNA结合蛋白(SSB)这是一些能够与单链DNA

7、结合的蛋白质因子。其作用为:①使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存在,即稳定单链DNA,便于以其为模板复制子代DNA;②保护单链DNA,避免核酸酶的降解。引物酶(合成RNA)引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶,该酶以DNA为模板,聚合一段RNA短链引物,以提供自由的3'-OH,使子代DNA链能够开始聚合。2.复制的延长由DNA聚合酶催化,以3‘→5’方向的亲代DNA链为模板,从5‘→3’方向聚合子代DNA链。在原核生物中,参与DNA复制延长的是DNA聚合酶Ⅲ。引发体向前移动,解开新的局部双螺旋,形成新的复制叉,滞后链重新合成RNA引物,继续进行链的延

8、长。解3.复制的终止去除引物,填补缺口;连接冈崎片段

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