实验3 种子生活力的测定

《实验3 种子生活力的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、实验3种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。一、氯化三苯基四氮唑（TTC）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原时，可产生红色的三苯基甲（TTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可

2、由染色的程度推知种子的生活力强弱。TTC还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。【试剂】TTC溶液的配制：取1gTTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC溶液。药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。3.把切好

3、的种子分别放在培养皿中，加TTC溶液，以浸没种子为度。4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。 表32-1染色法测定种子生活力记载表方法种子名称供试粒数有生活力种子粒数无生活力种子粒数有生活力种子占供式粒数的%            【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。2.染色温度一般以25～35℃为宜。3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好

4、、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。4.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；子叶不染色或丧失机能的组织超过1/2；胚染成很淡的紫红色或淡灰红色；子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分；胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。5.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入表。TTC法测定主要作物种子生活力要点作物种子准备TTC浓度(%)在35℃下染色时间(h)水稻去壳纵切0.12～3高粱、玉米及麦类作物纵

5、切0.10.5～1棉花、荞麦、蓖麻剥去种皮1.02～3花生甜菜大麻向日葵剥去种皮0.13～4大豆菜豆亚麻二叶草无须准备1.03～4二、红墨水（酸性大红Ｇ）染色法【原理】有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红Ｇ不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。【仪器与用具】与TTC法相同。【试剂】红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释20倍（1份红墨水加19份自来水）作为染色剂。【方法】1.先将待测种子用水浸泡3～4h，

6、待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3～5min，作为死种子。2.取浸好的新种子、陈种子和死种子各50粒，如为小麦和玉米，则用单面刀片沿胚部中线纵切成两半，其中一半用于测定。3.将备好的种子分别放在培养皿内，加入红墨水溶液，以浸没种子为度。4.染色10～20min后倾出溶液，用自来水反复冲洗种子，直到所染颜色不再洗出为止。5.对比观察冲洗后的新种子、陈种子和死种子胚部着色情况。凡胚部不着色或略带浅红色者，即具有生活力的种子，若胚部染成与胚乳相同的红色，则为死种子，把测定结果记入表（同TTC法）。 【思考题】TTC法和红墨水法测定种子生活力有何不同? 实验四种子水分测定标

7、准法和电子仪器速测法㈠实验目的　　1.了解电烘箱的结构、原理及使用方法。   2.掌握烘干法测定水分的方法及操作技术。　　　㈡主要内容　　1.低恒温烘干法(103土2℃烘箱法)　　2.高恒温烘干法(130～133℃烘箱法)　　3.水分快速测试仪法(电阻式、电容式)（三）．材料小麦种子（四）、用具烘箱、天平、粉碎器、称量盒、干燥器、水分仪（五）、方法、步骤高恒温烘干箱称取净种子样品30.0g→磨碎混匀→称烘盒重（M1）准确称取磨碎样品5.000g×2→分别置于烘盒内妨如放入烘箱内（130∽133℃，1h）→烘干后取出