榛花的降血糖作用及其机制的实验研究论文

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1、榛花的降血糖作用及其机制的实验研究论文.freelechanismsofhazel'sfloechanisms.Methods:bythemouseofexperimentaldiabetesinducedbyalloxan，bythemethodsofcontrol，iteasuredthebloodsugar，activityofsuperoxidedismutase（SOD）ofserum，amountofmalondialdehyde（MDA）ofserumandobservedhepaticgly

2、cogenandpancreasisletBcell.Results:Thehazel'sfloountofMDA，andincreasedtheactivityofSODandthecontentsofhepaticglycogen，butcouldnotmakethepancreasisletBcellrepairedandregenerated.Conclusion:TheHazel'sfloouseinducedbyalloxanMaybeitsmechanismofdecreasingbloods

3、ugarotingsynthesisofhepaticglycogenetc，clearancingfreeradicalsandprocessofanti-lipidperoxidation.Keyistry;Immunohistochemistry榛属桦木科植物，分布在东北、华北等地，据《中药大辞典》记载，榛的种仁即榛子有调中、开胃、明目，治病后体虚等作用［1］。2000年美国俄勒冈波特兰大学的化学家AngelaHoffman［2］报导榛木树的叶子、小枝和果实中含有有抗癌作用的Paclitaxel（泰素

4、）。而目前为止，国内外对榛花的研究报导甚微，2001年南征等人［3］首次报导榛花有解毒和降糖作用，但缺乏系统的实验研究佐证。为此，本实验通过生化检测、组织化学、免疫组织化学等研究方法观察了榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠的降糖作用，并初步探讨了其降糖机制。1材料1.1实验动物成年昆明种雄性小鼠，体重（20±2）g，由延边大学医学院资产处动物科提供。1.2药品与试剂榛花:春季采集东北自然生长的榛花，由延边大学长白山天然药物开发研究中心采用水提法提取（榛花780g加蒸馏水煮30～60min，过滤后浓缩至200ml，灌

5、封备用）;盐酸二甲双胍片:贵州圣济堂制药有限公司产品，批号20020109;四氧嘧啶:HONGKONGFARCOChemicalSupplies产品批号42011―3E;血糖试剂盒:中生北控生物科技股份有限公司产品，批号24011;SOD试剂盒:南京建成生物工程研究所产品，批号20030123;MDA试剂盒:南京建成生物工程研究所产品，批号20030107;兔抗小鼠Insulin免疫组化染色试剂盒:天津市灏洋生物制品科技有限责任公司产品。1.3主要仪器芬兰MK-3型酶标仪;德国ZK15型超低温离心机;德国L

6、eica820型组织切片机;日本OlympusVANOX型万能显微镜;北京天地百年科技有限责任公司TD-2000型真彩病理细胞显微分析系统。2方法2.1四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型的制备实验用成年雄性昆明种小鼠体重（20±2）g先适应性喂养1周后，禁食24h，自由饮水。将四氧嘧啶用生理盐水配成0.7%注射液，每只小鼠按70mg/kg尾静脉一次性注射。注射后第5天测空腹血糖，空腹血糖值大于10.00mmol/L者纳入糖尿病模型［4，5］。2.2动物分组及处理正常小鼠10只为正常对照组，糖尿病小鼠50只按血糖高低随

7、机分为5组，分别为模型对照组、药物对照组、实验组（大、中、小剂量组）。实验期间各组小鼠均给予块料喂养，实验组每日分别灌服榛花浓缩液5ml/kg（大剂量组），2.5ml/kg（中剂量组），1.25ml/kg（小剂量组）;药物对照组每日灌服盐酸二甲双胍1g/kg;模型对照组和正常对照组每日灌服相应体积的蒸馏水。实验周期为3周。2.3生化检测实验前及实验后，实验动物禁食12h后分别取眼眶静脉窦血，分离血清，应用血糖、血清SOD、MDA试剂盒分别测空腹血糖、血清SOD活性、MDA含量。血糖测定采用葡萄糖氧化酶法，血

8、清SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法，MDA测定采用硫代巴比妥酸（TBA）法。2.4组织化学观察实验结束后将小鼠脱颈处死，迅速剖取肝脏，将肝组织在4℃Carnoy氏液中低温固定6～8h，经上行酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，切成5μm切片，做过碘酸雪夫氏（PAS）反应显示肝糖原［6］。对照实验:用唾液消化肝组织中的糖原后，再做PAS反应。染色后用OLYMPUS万能显微镜观察拍片并利用病理显微分析系统进行定量分析（每组随