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1、黄芪多部位组合对化学性及免疫性肝损伤小鼠的保护作用论文.freelg/kg)明显降低D-GalN小鼠升高的肝脏指数、血清ALT水平及肝匀浆MDA的含量；恢复刀豆蛋白A(ConA)诱导的免疫性肝损伤小鼠脾淋巴细胞增殖反应,抑制其腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1的产生；同时还能降低其血清ALT和AST水平。结论黄芪多部位组合对化学性及免疫性肝损伤小鼠均有明显的保护作用。【关键词】黄芪肝损伤小鼠Abstract：ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsofpoundAstraga
2、lusExtract(CAE)onliverinjuryinmice.MethodsTheacuteliverinjurymodelsine(D-GalN,800mg/kg,ip)andBacillusCalmetteGuerin(BCG,1×107/0.2mL,iv)plusLipopolysaccharide(LPS7.5μg/0.2mL,iv)inmice.ALT,AST,MDAcontentinliverhomogenateetry.IL-1activityandConA-inducedsplenocytes
3、proliferationinedbyassayofcytotoxicityagainstL929cell.ResultsCAE(60,120,240mg/kg)couldobviouslyloandMDAcontentinliverhomogenateinD-GalNmiceandintheimmunologicalliverinjurymice.ItalsodecreasedALT,ASTlevelinserum,.freelmatoryfactorsTNF,IL-1secretedbyPMφs.Conclusi
4、onCAEshoicalandimmunologicalliverinjuryinmice.Keyice黄芪始载于《神农本草经》,具有补气升阳、固表止汗等功效1。现代临床研究认为,黄芪粗制剂对慢性肝炎均有较好的疗效,使大鼠肝纤维化程度明显减轻2。我们多年的研究还发现,黄芪总苷有抗炎、抗氧化、免疫调节、诱导肝癌细胞凋亡以及抗肝纤维化等作用3-6。由此,根据临床经验并结合中医理论,提取与分离了黄芪有效部位群(黄芪多糖、皂苷、酮及酚),再依据体外正交实验结果首次组成黄芪多部位组合(poundastragalusextrac
5、t,CAE)。本实验进一步对其抗小鼠肝损伤进行研究。1实验材料1.1动物与细胞株昆明种小鼠,雄性,6～8周,体重(18±2)g；C57BL/6J小鼠,雄性,6～8周,体重(20±2)g；均购于安徽医科大学实验动物中心(合格证号：皖医实动准字01号)。小鼠成纤维细胞瘤(L929)细胞株：南京军事医学研究所朱敏生教授惠赠。1.2药物与试剂CAE,合肥恒星医药研究所提供,批号20030508；研钵碾为细粉,0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na)混悬。护肝片,黑龙江五常葵花药业有限公司产品,批号20041016；卡介苗(
6、BCG),上海生物制品有限公司产品,用前以灭菌生理盐水配成所需浓度；D-氨基半乳糖胺(D-GalN)重庆医科大学生物医学工程研究室,批号020327；硫代巴比妥酸(TBA),上海化学试剂公司；谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司产品；3HTdR比放射性为37MBq/mL,中国原子能研究院同位素研究所产品；新生小牛血清(NBS),杭州四季清生物制品公司产品；RPMI-1640培养粉,美国Gibco公司产品；脂多糖(LPS)、Hepes、刀豆蛋白A(ConA)均为美国Sigma公司产
7、品。1.3仪器Napco-6100型CO2培养箱,美国杜邦公司产品；YJ-1450型医用净化工作台,苏净集团安泰公司制造；LDR4-8.4低温离心机,北京医用离心机厂生产；XSZ-D倒置显微镜,重庆光学仪器厂产品；GL20A全自动高速冷冻离心机,湖南仪器仪表总厂离心机厂；LS-6500型液体闪烁计数仪,美国Beckman公司产品；内切式组织匀浆机,浙江机械厂产品。2实验方法2.1D氨基半乳糖胺诱导小鼠急性肝损伤模型的建立及处理7昆明种小鼠60只,随机平均分组：正常组、模型组、CAE3个剂量组(60,120,240mg
8、/kg)和护肝片组(800mg/kg)。灌胃给药或溶媒,1次/d,共7d,腹腔注射D-GalN800mg/kg,给药容积0.1mL/10g,正常对照组腹腔注射等量的生理盐水。造模后24h眼眶采血、摘取肝脏,进行血清ALT、肝匀浆丙二醛(MDA)的测定。2.2卡介苗＋脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型的建立及处理8昆明种小鼠60只,随机平均分组(同上
