蒽酮比色法测定可溶性糖

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1、蒽酮比色法测定可溶性糖一、原理：糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。二、材料、仪器设备及试剂（一）材料阴干野扁桃果实（二）仪器设备分光光度计、水浴锅、具塞刻度试管、移液管、容量瓶、定性滤纸等（三）试剂浓硫酸（比重1.84）、分析纯蔗糖、分析纯蒽酮、乙酸乙酯蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，用时微热溶解结晶。三

2、、实验步骤（一）标准曲线1、1%蔗糖标准液将分析纯蔗糖在80℃下（2h）烘至恒重，精确称取1.000g，加少量水溶解，转入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。2、100μg/L蔗糖标准液精确吸收1%蔗糖标准液1ml转入100ml容量瓶中，加水至刻度。3、标准曲线取20ml刻度试管11支，从0-10分别编号，按下表加入溶液和水。试剂01、23、45、67、89、10100μg/L蔗糖液/ml00.20.40.60.81.0蒸馏水/ml2.01.81.61.41.21.0然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立

3、即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其吸光度，的数据如下：吸光度00.180.350.530.700.90蔗糖含量020406080100y=112.12x+0.2923R²=0.9995（二）可溶性糖的提取1、提取取野扁桃样品，擦净表面污物，称取果肉、果仁各5份（共10组）（详重见下表）分别放入10支刻度试管中，加5ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min，提取液滤入25ml容量瓶，反复漂洗试管残渣，定容至刻度。2、显色测定吸取样品提取液0.5ml于20ml刻度试管中，加蒸馏水1.5ml。按顺

4、序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其吸光度，结果见下表：果仁样品干重（g）吸光度果肉样品干重（g）吸光度10.040.27960.040.22720.040.62270.060.45230.030.32180.070.33540.030.26290.050.34450.030.25100.050.333平均0.0340.3458平均0.0540.3382四、结果计算从回归方程求得糖量（y）×提取液量（5）×稀释倍数（5）可溶性糖含量＝

5、吸取样品液的体积（0.5）×100％样品干重（0.05）×106实验结果：野扁桃果仁可溶性糖含量＝5.74％野扁桃果肉可溶性糖含量＝3.54％新疆野扁桃果实糖酸含量的测定——蒽酮比色法测可溶性糖指导老师：曾斌实验指导老师：帕提曼实验学生：苏瑞（063231240）实验时间：2008年10月