生物物质分离工程实验 - 生命科学学院- 湖北大学

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1、湖北大学生物物质分离工程实验(0704300793)实验教学大纲(第2版)生命科学学院生物学实验教学中心2010年8月前言课程名称:生物物质分离工程实验实验学时:30学时适用专业:生物工程;生物技术;课程性质:专业基础必修一、实验课程简介植物生物学实验主要包括植物的形态解剖,系统分类及与环境的关系实验内容学习,以及相关的实验仪器设备使用操作;植物结构层次包含有细胞.组织.器官.个体.种群.群落.系统类群,植物分类阶元涉及界.门.纲.目.科.属.种。技能方面主要包括解剖观察,分类鉴定,相关仪器设备用具的操作使用实训。二、课程目的生物物质分离实

2、验课是生物技术、生物工程专业本科教学中的一门重要专业基础实验课,通过实验教学可以加强学生对专业基础知识和基本理论的理解,了解和掌握生物物质分离纯化的原理、方法及应用,培养学生正确记录实验数据和现象、正确处理实验数据和分析实验结果的能力。实验要求学生独立操作,仔细记录观察并完成实验报告。三、考核方式及成绩评定标准考核方式:设计性实验报告和操作成绩评定标准:设计性实验报告和操作(占50%)+其它实验报告(占30%)+实验表现(占20%)。四、实验指导书及主要参考书1、生物分离工程实验刘叶青主编高等教育出版社2007.82、酶制剂生产与应用杨昌鹏

3、主编中国环境科学出版社2006.83、自编部分实验内容五、实验项目实验项目一览表序号实验项目名称实验类型实验学时必做/选做实验一鸡蛋清中溶菌酶的提取及纯度鉴定综合性3必做实验二鸡蛋黄中卵磷脂的分离纯化和鉴定综合性3必做实验三双水相萃取系统中聚合物分子量对相图的影响综合性3必做实验四影响双水相萃取系统相体积比因素综合性3必做实验五双水相萃取系统中蛋白质分配系数的测定-1综合性3必做实验六双水相萃取系统中蛋白质分配系数的测定-2综合性3必做实验七离子交换树脂的预处理及交换容量的测定综合性3必做实验八有机溶液萃取法中pH对表观分配系数的影响综合性

4、3必做实验九离子交换法提取抗生素的工艺研究-1设计性3必做实验十离子交换法提取抗生素的工艺研究-2设计性3必做实验一鸡蛋清中溶菌酶的提取及纯度鉴定(3课时)实验类型:综合性实验目的:掌握从蛋清制备溶菌酶的原理和方法(等电点沉淀和盐析法)。实验内容:由于蛋白质在等电点时溶解度最低,所以蛋白质的沉降在等电点附近最为显著。若控制溶液的pH在等电点附近,并增加盐的离子强度,使蛋白质处于沉降前的“临界状态”,在适当的温度下,静置若干时间,蛋白质会以结晶的形式从溶液中析出。加入晶种,能控制晶体的形状、大小和均匀度,若结晶液浓度太低而结晶发生困难时,可适

5、当加入些晶种,能使结晶顺利进行。实验要求:1、溶菌酶晶种的制备:2、实验器材的准备:组织捣碎机(或电动搅拌机)、纱布、大烧杯、玻璃棒、冰箱、pH试纸、真空干燥器、多用循环水真空泵、布氏漏斗等。3、二人一小组,独立操作,并完成实验报告。实验二鸡蛋黄中卵磷脂的分离纯化和鉴定(3课时)实验类型:综合性实验目的:1、了解卵磷脂的性质。2、学习提取卵磷脂粗品的方法。实验内容:机体的各种组织和细胞均含卵磷脂。在蛋黄(约10%)、神经、精液、脑髓、骨髓、肾上腺、心脏、蘑菇和酵母等组织内含量很高。卵磷脂分子中具有亲水基团和疏水基团,卵磷脂具有降低表面张力的

6、作用;卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”,蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒,这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用,而不会使血浆中的胆固醇增加,可作为药物用于动脉粥样硬化等疾病的综合治疗。实验要求:1、实验药品的准备:(1)试剂:新鲜蛋黄、95%乙醇、10%的NaOH溶液、丙酮、乙醚。2、实验器材的准备:磁力搅拌机(或玻棒)、减压真空浓缩装置、恒温水浴锅、冰箱、多用循环水真空泵、布氏漏斗、玻璃漏斗、玻璃棒、小烧杯等。3、二人一小组,独立操作,并完成实验报告。实验三双水相萃取系统中聚合物分子量对相图的影响(3课时)实

7、验类型:综合性实验目的:掌握用浊点法制作双水相系统相图的方法,加深对相图的认识。实验内容:两水相形成的条件和定量关系可用相图来表示,相图是研究双相萃取的基础。相图是一条双节线,当成相组分的配比取在曲线下方时,系统为均匀的单相,混合后溶液澄清透明,称为均相区;在曲线的上方时,能自动分成两相,称为两相区;若配比取在曲线上,则混合后,溶液恰好从澄清变为混浊。而聚合物分子量的大小会影响相图的位置和形状,通过改变聚合物PEG分子量的大小,来绘制相图。实验要求:1、实验器材及试剂:(NH4)2SO4溶液、PEG400、PEG6000、蒸馏水、漩涡振荡器

8、、微量滴管装置、电子天平、微量注射器、大试管、移液管等。2、二人一小组,独立操作,并完成实验报告。实验四影响双水相萃取系统相体积比的因素(3课时)实验类型:综合性实验目的:1、了

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