增殖细胞核抗原和cd44mrna在伴有静脉侵袭的结直肠癌中的表达及其与肝转移的关系论文

《增殖细胞核抗原和cd44mrna在伴有静脉侵袭的结直肠癌中的表达及其与肝转移的关系论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、增殖细胞核抗原和CD44mRNA在伴有静脉侵袭的结直肠癌中的表达及其与肝转移的关系论文【关键词】,.freelRNA的表达及其与肝转移的关系.方法采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测31例伴有静脉侵袭的结直肠癌组织中PA和CD44mR-NA的表达状况.结果PA和CD44mRNA在结直肠癌组织中阳性表达率分别为100%和64.5%.在有肝转移的结直肠癌组织中，PA和CD44mRNA的强表达率分别为94.1%和70.6%，表达强度明显高于无肝转移者（P0.05和P0.01）.PA和CD44的表达存在正相关（r=0.67，P0.05）.结论结直肠癌组织中PA和CD44的联合

2、检测对判断癌细胞的肝转移具有一定的参考价值.Keys;liverneoplasms/secondary;poly-merasechainreactionAbstract:AIMToinvestigatetheexpressionofprolifera-tingcellnuclearantigen（PA）andCD44mRNAinvenousinvasionalcolorectalcanceranditsrelationshipetastasis.METHODSReversetranscriptase-polymerasechainreaction（RT-PCR）RNAin31cas

3、esofcolorectalcanceretastasis.TheexpressionsofPAandCD44mRNAin31casesofvenousinvasionalcolorectalcancer.RESULTSPositiveexpressionratesofPAandCD44mRNAinthecolorectalcanceretastasis（P0.05andP0.01）.Incasesofcol-orectalcanceretastasis，94.1%and70.6%RNA，respectively，significantlyhigherthanthoseetasta

4、sis.Thereightbeusefulforevaluatingthelivermetastasisofcancercells.0引言既往研究报道.freelRNA在伴有严重静脉侵袭的结直肠癌组织中的表达，并探讨两者与结直肠癌肝转移的关系.1对象和方法1.1对象本院收治的伴有严重静脉侵袭的结直肠癌31（男20，女11）例，年龄44～82（平均66）岁.按病理学诊断标准，结直肠癌静脉侵袭程度分为v0～v3，选取严重静脉侵袭的v3期病例作为研究对象，伴有肝转移者17例.术后立即将肿瘤标本投入液氮，-80℃保存备用.RNA抽提试剂盒购自Gibco公司;Taq酶购自Takara公司;P

5、A、CD44及β-actin的引物均由上海博亚公司合成.PA的上游引物序列:5’-GCCGAGATCTCAGCCATATT-3’，下游引物:5’-ATGTACTTAGAGGTACAAAT-3’;CD44上游引物序列:5’-CTTCATCCCAGTGACC-TCAG-3’，下游引物:5’-TGCCACTGTTGATCAC-TAGC-3’;β-actin上游引物:5’-CACCATGTACC-CTGGCATTG-3’，下游引物:5’-TAACGCAAC-TAAGTCATAGT-3’.预期扩增产物的大小分别为452bp，446bp和243bp.1.2方法利用TRIzol试剂盒（Gibco

6、），按操作说明提取组织总RNA.分光光度计测量RNA纯度及含量，-80℃保存备用.在50μL的反应体积中加入5μg总RNA，5×反应缓冲液10μL，10mmolL-1dNTPs5μL，RNasin20U，oligo（dT）12-180.25μg，反转录酶（M-MLV，Gibco）200U，0.1molL-1DTT0.5μL，置37℃孵育1h，65℃加热5min终止反应.在25μL反应体积中加入cDNA0.1μg，10×PCR缓冲液2.5μL，2mmolL-1dNTPs2.5μL，25mmolL-1MgCl22.5μL，各引物20pmol，TaqDNA聚合酶（Takara）5U.使用

7、PTC-100PCR仪（MJResearch）进行热循环.循环条件:93℃1min预变性;93℃30s，56℃30s，72℃1min，35个循环;72℃延伸8min.取各扩增产物10μL，经3gL-1琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色后，用UVP凝胶成像系统及LabRNA的相对表达量.表达强度分为3级，+:占β-actin密度的1%～30%;:31%～65%;:66%～100%.统计学处理:所有结果进行χ2检验.2结果2.1PA和CD44mRNA在结直肠癌组织中的表达RT-